CD3+CD56+NKT-like细胞在原发性干燥综合征外周血和唇腺组织的分布及作用机制

摘要

目的：研究CD3+CD56+NKT-like细胞在原发性干燥综合征(primary Sjogren's syndrome，pSS)患者外周血、唇腺组织中的分布，探索NKT-like细胞在pSS中可能的作用机制。
　　方法：CD3+CD56+标记NKT-like细胞，采用流式细胞术检测pSS患者及健康对照组外周血NKT-like细胞比例、其表面CX3CR1、CXCR5、FasL的表达，用CFSE染色检测NKT-like细胞的增殖能力，用AnnexinⅤ/7AAD标记凋亡状态，胞内细胞因子刺激(ICCS)法观察NKT-like细胞细胞因子的表达谱。分别用ELISA及CBA法测定血清CXCL13和CX3CL1含量。用体外趋化实验验证重组人CX3CL1(rhCX3CL1)和重组人CXCL13(rhCXCL13)对NKT-like细胞的趋化作用。免疫荧光法探测CD3+CD56+NKT-like细胞在唇腺组织中的分布及CX3CR1在唇腺组织中的表达，用免疫组化法探测CX3CL1在唇腺组织的表达。结合外周血流式染色、血清的结果以及临床资料进行相关性分析。
　　结果：与健康对照组(HC)相比，pSS患者CD3+CD56+NKT-1ike细胞在外周血中显著减少，且增殖能力及凋亡状态无显著差异。但在唇腺组织中表达增多，主要分布在腺泡周围。pSS患者外周血CX3CL1、CXCR5水平升高，其中CX3CL1的水平与血清IgG水平正相关。pSS患者外周血CD3+CD56+NKT-like细胞表面很少表达CXCR5，多表达CX3CR1，与HC均无显著性差异。rhCX3CL1对CD3+CD56+NKT-like细胞有显著的趋化作用，且随着浓度的增加，趋化作用增强，而rhCXCL13则无显著的趋化作用。pSS患者唇腺组织中腺泡上皮细胞高表达CX3CL1，而HC几乎很少表达;同时浸润唇腺组织的淋巴细胞多表达CX3CR1，包括腺泡周围淋巴细胞。pSS患者外周血CD3+CD56+NKT-like细胞以分泌TNF-α和IFN-γ为主，很少分泌IL-4，几乎不分泌IL-17，分泌各细胞因子的能力与HC相当。
　　结论：在pSS中，CD3+CD56+NKT-like细胞可能受到唇腺上皮细胞高表达的CX3CL1的募集，在唇腺组织（尤其是腺泡周围）聚集，造成外周血NKT-like细胞减少。聚集的NKT-like细胞可能通过分泌IFN-γ、TNF-α等Th1型细胞因子加速唾液腺的损害，导致腺体萎缩、功能下降。

目录

摘要

前言

材料及方法

一、研究对象

二、主要仪器和试剂

三、实验方法

四、统计学分析

结果

讨论

结论

参考文献

论文综述 趋化因子CX3CL1-CX3CR1与自身免疫病

附录

致谢

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