杨属植物根内生及根际细菌多样性研究

摘要

本文采用纯培养方法，对杨属植物（Populus）样品进行细菌培养，通过形态学和分子生物学理论，确定杨树植物根及根际细菌群落组成;比较健康植株与非健康植株（患有杨树溃疡病）根、根际细菌群落的变化和差异，明确溃疡病发生对杨属植物中细菌群落结构的影响，为杨属植物溃疡病的发病机理及其防控提供理论依据;比较抗性不同的杨属植物根、根际等细菌组成与差异，为研究植物抗性与微生物多样性的关系提供基础。本研究主要获得以下结果:
　　采用稀释涂布法将所采集的杨属植物样品稀释涂布于R2A和NA固体培养基，统计表明根内生细菌生物量多分布于103～104 cfu·g-1，根际和非根际土壤细菌生物量多分布于105～106 cfu·g-1，其中非根际土壤细菌生物量仅为根际土壤细菌生物量的1/2。不同健康程度样品中，健康植株样品中的细菌生物量普遍少于非健康样品。不同抗性样品中，根内生菌生物量随植物抗性增强而减少，根际、非根际土壤细菌生物量几乎不变。同时发现，同一杨属植物根内生细菌生物量与根际土壤细菌生物量成正相关。
　　通过对分离纯化得到的细菌进行16S rDNA测序比对显示，分离得到的菌株分属于27属，共76种，其中，健康植物样品中分离得到22属，53种;非健康（患有杨树溃疡病）样品中得到22属，46种。根中分离得到内生细菌分属于16属，34种，根际土壤中分离得到细菌分属于13属，39种，非根际中分离得到16属，31种。
　　假单胞菌属(Pseudomonas)、芽孢杆菌属(Bacillus)为根、根际及非根际样品中的优势属，分别占所分离细菌组成总体的33％和15％。同时，在根样品中，葡萄球菌属(Staphylococcus)占有较大比例，占根内生细菌总体的8.8％;根际样品中，溶杆菌属(Lysobacter)和剑菌属（Ensifer）占有较大比例，分别占根际细菌总体的7.7％、7.7％;非根际样品中，壤霉菌属(Agromyces)和链霉菌属（Streptomyces）占有较大比例，分别占非根际总体的6.2％、6.2％。

目录

声明

摘要

第一章 绪论

1．1 引言

1．1．1 杨属(Populus)概况

1．1．2 杨属植物主要病害

1．2 植物内生菌研究进展

1．2．1 植物内生菌的定义及其发展

1．2．2 植物内生菌多样性的研究现状及发展趋势

1．2．3 内生菌多样性与植物病害的关系

1．2．4 杨属植物内生菌多样性研究进展

1．2．5 植物内生菌的研究方法

1．3 植物根际、非根际土壤微生物研究进展

1．3．1 植物根际、非根际的概念及其发展

1．3．2 植物根际、非根际土壤微生物多样性研究现状及发展趋势

1．3．3 根际、非根际微生物多样性与植物病害的关系

1．4 研究目的及意义

1．5 研究内容

1．6 技术路线

第二章 杨属植物根内生细菌多样性研究

2．1 材料和方法

2．1．1 试验材料

2．1．2 主要仪器

2．1．3 培养基

2．1．4 试验所用试剂

2．1．5 细菌的分离和计数

2．1．6 植物根表面消毒

2．1．7 细菌群落多样性指数计算

2．1．8 菌株的纯化和保藏

2．1．9 DNA序列测定

2．2 结果与分析

2．2．1 植物根样品表面消毒结果

2．2．2 细菌生物量统计结果

2．2．3 细菌16S rDNA序列对比结果

2．3 讨论

2．3．1 杨属植物根内生细菌生物量

2．3．2 杨属植物根内生细菌物种多样性

2．3．3 杨属植物茎干、根内生细菌的差异

第三章 杨属植物根际、非根际土壤细菌多样性研究

3．1 材料和方法

3．1．1 试验材料

3．1．2 主要仪器

3．1．3 培养基

3．1．4 试验所用试剂

3．1．5 细菌的分离和计数

3．1．6 细菌群落多样性指数计算

3．1．7 菌株的纯化和保藏

3．1．8 DNA序列测定

3．2 结果与分析

3．2．1 细菌生物量统计结果

3．2．2 细菌16S rDNA序列比对结果

3．3 讨论

3．3．1 杨属植物根际土壤细菌生物量

3．3．2 杨属植物根际土壤细菌物种多样性

3．3．3 杨属植物根际、非根际土壤细菌差异

第四章 结论

参考文献

致谢