柴胡疏肝散抗氧化活性及其活性成分柚皮苷药代动力学的研究

摘要

柴胡疏肝散(CSGS)是中国传统经典方剂，由七味药材组成，具有疏肝解郁，活血止痛的功效，临床上用于治疗消化系统、神经系统、心血管系统及妇科等各类疾病，药理研究表明其具有抗抑郁作用。当今，人们面临着来自各方面的巨大的精神压力，抑郁症已成为困扰我国的第二大类疾病。为进一步阐释CSGS抗抑郁的药理作用机制及物质基础，论文研究了柴胡疏肝散的体内外抗氧化活性，探讨抗氧化活性与抗抑郁作用之间的联系。并对复方中抗抑郁活性成分柚皮苷(NA)进行了药代动力学研究，考察复方中柚皮苷及单体柚皮苷在大鼠体内代谢规律的差异。
　　 实验采用六种方法，评价CSGS水提物体外抗氧化活性。CSGS体外具有一定的铁离子还原能力和自由基清除能力，其还原能力即总抗氧化能力相当于0.24 mmol FeSO4每克复方水提物，清除DPFH(1，1-二苯基-2-苦基苯肼)自由基、ABTS[2，2-连氮(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐]阳离子自由基、O2(超氧阴离子)及·OH(羟自由基)的IC50分别为0.83 mg·mL-1、1.03 mg·mL-1、10.31 mg·mL-1、7.79 mg·mL-1，氧自由基吸收能力ORAC值为1.50±0.19μmol Trolox/mg。建立氧化应激模型，通过测定全血中谷胱甘肽(GSH)含量，肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MAD)含量考察CSGS对束缚导致氧化应激反应小鼠的体内作用。在束缚应激状态下，CSGS能显著改善机体中SOD及CAT活性，提高GSH含量，增强机体抗氧水平，抑制脂质过氧化，降低脂质代谢物MDA的含量。
　　 柚皮苷(NA)为CSGS中入血的抗抑郁活性成分之一，实验采用LC-MS/MS建立专属性检测方法快速定量大鼠血清中药物含量。通过对大鼠口服CSGS水提物(2.5 g·kg-1)及方中相同剂量的单体NA(5.075 mg·kg-1)后的血清样品进行含量测定，发现两者血药浓度-时间关系曲线均呈现双峰现象，CSGS中两次达峰时间较NA向后推迟，表明NA的体内代谢可能存在肝肠循环。用药代动力学软件WinNonlin对所得数据进行分析，CSGS和NA单体的消除半衰期分别为171.8932 min和255.7001 min表明复方中NA比NA单体消除快，不易滞留，毒副作用小。两者进入血循环总量分别为840.2175 min*mg/L和114.0243 min*mg/L，表明复方中NA入血起效量较多，生物利用度更高。两者持续时间分别为523.3516min，274.8070 min，说明复方中的NA药效更为持久。
　　 柴胡疏肝散可清除过氧自由基，抑制脂质过氧化反应，缓解氧化应激损伤，提高机体抗氧化能力，CSGS抗抑郁作用的发挥可能部分来自其抗氧化活性的贡献。复方中柚皮苷及单体柚皮苷在大鼠体内药物代谢的差异表明，复方中单体利用度更高、毒副作用小、疗效更为持久，也说明了复方组方用药的合理性。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一章绪论

1.1柴胡疏肝散的研究概况

1.1.1组方药材主要化学成分及功用

1.1.2柴胡疏肝散的药理作用

1.1.3柴胡疏肝散的临床应用

1.2抗氧化活性的评价

1.2.1体外抗氧化活性测定方法

1.2.2体内抗氧化水平相关生化指标及测定原理

1.3中药复方体内代谢及药代动力学研究

1.3.1中药复方药代动力学研究概况

1.3.2柴胡疏肝散中主要化学组分代谢产物

第二章柴胡疏肝散抗氧化活性的研究

2.1研究目的和意义

2.2材料和方法

2.2.1主要药品和试剂

2.2.2主要仪器

2.2.3柴胡疏肝散及组方药材水提物的制备

2.2.4柴胡疏肝散水提物中总黄酮含量测定

2.2.5体外抗氧化活性测定

2.2.6实验动物

2.2.7体内抗氧化活性测定

2.2.8统计分析

2.3实验结果

2.3.1柴胡疏肝散总黄酮含量测定结果

2.3.2柴胡疏肝散体外抗氧化活性测定结果

2.3.3柴胡疏肝散组方药材DPPH自由基清除能力测定

2.3.4柴胡疏肝散体内抗氧化活性测定结果

2.4讨论

第三章柴胡疏肝散中柚皮苷的药代动力学研究

3.1课题相关研究背景

3.2材料和方法

3.2.1主要药品与试剂

3.2.2主要仪器

3.2.3柴胡疏肝散水提物的制备

3.2.4实验动物

3.2.5实验方法

3.3方法学考察

3.3.1专属性

3.3.2线性范围

3.3.3灵敏度

3.3.4精密度

3.3.5回收率

3.3.6稳定性

3.4血药浓度及药代动力学分析

3.5讨论

3.5.1实验条件的优化

3.5.2内标物的选取

3.5.3给药剂量确定

3.5.4样品预处理方法考察

3.5.5测定方法学考察

3.5.6样品测定结果

3.5.7不同药代动力学分析软件对分析结果的影响

第四章总结与讨论

参考文献

致谢

研究成果及发表的学术论文

作者和导师简介