高速逆流色谱结合大孔树脂及功能化磁性纳米粒子分离薇甘菊中黄酮类化合物的研究

摘要

薇甘菊是一种外来入侵植物，对我国的生态环境造成严重的威胁。为更有效的防治薇甘菊，对其进行资源化利用，需要对薇甘菊中的活性组分进行分离分析。天然类黄酮不但有着抗氧化抗衰老活性，而且具有一定的抗炎、抗病毒、预防癌症等功效，是薇甘菊中一类主要的活性物质。高速逆流色谱是一种不需要固态支撑材料、无不可逆吸附的液液分配色谱，具有回收率高、重现性好、制备量大、成本低、环境友好等优点，被广泛应用于黄酮类化合物的分离。
　　本论文主要研究应用高速逆流色谱分离薇甘菊中的天然类黄酮化合物。取得的主要研究成果如下:
　　1.以大孔树脂为前处理方法，创建了大孔树脂结合高速逆流色谱分离薇甘菊中四种黄酮类化合物的方法。选取大孔树脂AB-8，洗脱液为50％(v/v)乙醇水溶液，高速逆流色谱溶剂体系为正丁醇-乙酸-水(4∶1∶5v/v)。从薇甘菊中成功分离了槲皮素-3-O-芸香糖苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、木犀草苷和紫云英苷，其纯度分别为90.2％、98.55％、98.33％、99.23％。这种大孔树脂-高速逆流色谱方法简单、高效，可扩展应用于其他植物中分离黄酮类物质。
　　2.设计了磁性纳米粒子-高速逆流色谱在线分离装置，考察了几种磁性纳米粒子对黄酮标准物质的吸附脱附能力，选取最适宜分离黄酮类化合物的Fe3O4@DIH@EMIMLpro粒子，装填了聚四氟管磁性纳米粒子色谱柱，证明功能化磁性纳米粒子色谱柱可以应用于黄酮类化合物的分离。应用磁性纳米粒子-高速逆流色谱法在线分离薇甘菊中的黄酮类物质，证明该装置切实可行，为分离天然产物中的活性物质提供了一种新的思路。

目录

声明

摘要

第一章 绪论

1．1 薇甘菊简介

1．1．1 薇甘菊的分布及危害

1．1．2 薇甘菊的化学成分及生物活性研究概况

1．1．3 薇甘菊的防治与利用

1．2 黄酮类化合物的概述

1．2．1 黄酮类化合物的分类及结构特点

1．2．2 黄酮类化合物的生理活性

1．2．3 黄酮类化合物的应用

1．2．4 黄酮类化合物的提取及分离方法

1．3 大孔树脂吸附分离技术

1．3．1 大孔树脂简介

1．3．2 大孔树脂吸附解吸机理

1．3．3 大孔树脂吸附分离技术的应用

1．4 磁性纳米材料简介

1．4．1 磁性纳米材料的性质

1．4．2 磁性纳米材料的合成

1．4．3 磁性纳米材料的表面修饰

1．4．4 磁性纳米材料在分离黄酮类化合物方面的应用

1．5 高速逆流色谱技术

1．5．1 高速逆流色谱简介

1．5．2 高速逆流色谱原理

1．5．3 逆流色谱联用技术

1．6 选题目的

1．7 课题主要研究内容

第二章 高速逆流色谱结合大孔树脂分离薇甘菊中的四种黄酮类物质的研究

2．1 实验试剂、材料及仪器

2．1．1 实验试剂

2．1．2 实验材料

2．1．3 实验仪器

2．2 实验内容

2．2．1 薇甘菊样品的预处理

2．2．2 薇甘菊中黄酮类化合物的粗提方法

2．2．3 薇甘菊粗品的液相方法

2．2．4 大孔树脂的预处理

2．2．5 大孔树脂的选择

2．2．6 逆流色谱的分离的操作步骤

2．3 实验结果与讨论

2．3．1 薇甘菊粗品中的黄酮类物质

2．3．2 大孔树脂的选择

2．3．3 逆流色谱分离薇甘菊中四种黄酮类化合物

2．4 小结

第三章 高速逆流色谱结合功能化磁性纳米粒子富集分离薇甘菊中黄酮类物质的研究

3．1 实验材料、试剂及仪器

3．1．1 实验材料

3．1．2 实验试剂

3．1．3 实验仪器

3．2 实验内容

3．2．1 薇甘菊样品中黄酮类物质的粗提方法

3．2．2 建立五种黄酮标准品的液相方法

3．2．3 建立五种黄酮标准品的标准曲线

3．2．4 磁性纳米粒子的选取

3．2．5 磁性纳米粒子色谱柱分离黄酮类化合物考察

3．2．6 高速逆流色谱结合功能化磁性纳米粒子富集分离薇甘菊中的黄酮类物质

3．3 实验结果与讨论

3．3．1 五种黄酮标准品液相色谱分析方法的建立

3．3．2 薇甘菊粗品液相色谱分析方法的优化

3．3．3 五种黄酮标准品的标准曲线

3．3．4 磁性纳米粒子的选取

3．3．5 磁性纳米粒子色谱柱富集分离五种黄酮标准物质

3．3．6 磁性纳米粒子富集薇甘菊粗品中的黄酮类物质研究

3．3．7 高速逆流色谱结合磁性纳米粒子在线分离麓甘菊中的奠酮类化合物初探

3．4 小结

第四章 结论与展望

3．1 结论

3．2 创新点

3．3 展望

参考文献

研究成果及发表的学术论文

致谢

作者及导师简介