聚天冬氨酸-聚乳酸羟基乙酸接枝共聚物的制备及肺部给药靶向性研究

摘要

肺部给药作为一种直接到达肺部病灶的给药方式，不仅可以应用于肺部，还可以跟随血液流动实现全身给药。这种直达肺部的“区域靶向性”给药面临的问题两种:吸入制剂符合肺部可吸入性空气动力学直径要求且能够在肺部沉积，以及能够“精确靶向”到癌细胞的靶向机制。
　　癌细胞中谷胱甘肽的浓度远高于正常细胞，本文设计了一种以可生物降解材料聚天冬氨酸(PASP)通过连接二硫键修饰肺部给药常用的聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)的具有氧化还原敏感性的两亲性聚合物(PLGA-SS-PASP)。通过HNMR1、FTIR等光谱手段表征其化学结构，并考察了W/O/W双乳化法和自组装法两种载药方式包载阿霉素的能力并确认最优制备工艺。
　　通过体外释药实验和细胞实验进行体外释放评价，体外药物释放实验表明随环境中还原性的提高可以控制载体释放疏水类抗癌药物阿霉素。细胞毒性实验表明，空载PLGA-SS-PASP对人肺癌细胞A549和正常肝细胞QSC7701无毒副作用，而搭载阿霉素的PLGA-SS-PASP/DOX对A549毒性作用明显，对QSC7701无明显毒害。同时，通过流式细胞仪检测A549细胞凋亡结果可以证明载药纳米粒可以促进阿霉素对癌细胞的凋亡效应，而载体本身无生物毒性。
　　最后，本文对两种载药制备的载体进行了肺部可吸入性评价，通过考察其空气动力学粒径和肺部沉积分布确认了PLGA-SS-PASP这种聚合物制备的载体适合于肺部给药。同时对PLGA-SS-PASP/DOX雾化后的物理性质和控释效果进行评价，实验证明雾化过程对载体稳定性和释药效果无明显影响。

目录

声明

摘要

符号说明

第一章 绪论

1．1 肺部给药方式研究现状

1．2 肺部给药载体研究现状

1．2．1 聚合纳米粒子研究现状

1．2．2 脂质体研究现状

1．2．3 其他纳米给药系统研究现状

1．3 聚合物药物控释体系研究现状

1．3．1 温度敏感药物控释系统

1．3．2 pH敏感药物控释系统

1．3．3 氧化还原敏感性

1．4 本课题的创新之处

1．4．1 论文选题的立论、目的和意义

1．4．2 本课题的主要研究内容

1．4．3 研究方案

第二章 共聚物合成与表征

2．1 前言

2．2 材料与仪器

2．2．1 药品与试剂

2．2．2 主要仪器

2．3 实验方法

2．3．2 聚乳酸-羟基乙酸共聚物接枝胱胺(PLGA-CYS)处理方法

2．4．1 PLGA-SS-PASP聚合物的制备与表征

2．4．2 临界胶束浓度测定

2．5 本章小结

第三章 双乳化载药法及优化

3．1 前言

3．2 实验药品及实验仪器

3．2．1 药品与试剂

3．2．2 主要仪器

3．3 实验方法

3．3．2 PLGA-SS-PASP／DOX颗粒粒径、zeta电位测试

3．3．3 样品包封率测试方法

3．3．4 优化条件实验

3．4 实验结果与讨论

3．4．2 双乳化实验条件对PLGA-SS-PASP／DOX颗粒物性影响

3．6 本章小结

第四章 自组装载药法及优化

4．1 前言

4．2 实验药品及实验仪器

4．2．1 实验药品

4．2．2 主要实验仪器

4．3 实验方法

4．3．1 自组装载药法

4．4．3 优化实验条件

4．4 实验结果与讨论

4．4．1 不同接枝率对载体物性影响

4．4．2 有机溶剂的选择对载体物性影响

4．4．3 扫描电子显微镜观察

4．5 本章小结

第五章 体外释药评价

5．1 前言

5．2 实验药品及实验仪器

5．2．1 实验药品

5．2．2 主要实验仪器

5．3 实验方法

5．3．1 体外药物释放曲线

5．3．2 细胞培养用液的配制

5．3．3 细胞培养的方法

5．3．4 PLGA-SS-PASP／DOX纳米颗粒细胞毒性研究

5．3．5 PLGA-SS-PASP／DOX纳米颗粒细凋亡分析

5．4 实验结果与讨论

5．5 本章小结

第六章 肺部给药条件模拟

6．1 前言

6．2 实验药品及主要仪器

6．2．1 实验药品

6．2．2 实验仪器

6．3 实验方法

6．3．1 撞击器法测定空气动力学直径

6．3．2 雾化后粒径和Zeta电位测试

6．3．3 雾化后体外释药

6．4 实验结果

6．4．1 PLGA-SS-PASP／DOX的可吸入性评价

6．4．2 PLGA-SS-PASP／DOX吸入制剂表征

6．5 小结

第七章 总结

7．1 主要结论

7．2 文章的创新点

7．3 存在的问题与可持续性研究

参考文献

致谢

硕士学位期间的成果

作者和导师简介