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摘要
符号说明
第一章传染性法氏囊病文献综述
1传染性法氏囊病病毒病原学
1．2基因组结构
2传染性法氏囊病流行病学
2．2流行特点
2．3临床症状
2．4IBDV分子流行病学
3传染性法氏囊病的诊断
3．1临床诊断
3．2实验室诊断
4传染性法氏囊病的防控
5传染性法氏囊病疫苗研究进展
5．2新型基因工程疫苗
6本研究的目的和意义
第二章传染性法氏囊病病毒变异株分离鉴定
1．2主要仪器
2．1病毒RNA的提取
2．2RT-PCR检测病毒
2．3NT2020-8株VP2基因及VP1部分基因片段扩增及载体连接
2．4NP2104株全基因测序
2．5遗传进化树分析
2．6氨基酸变异分析
2．9动物回归实验
3结果
3．1病料RT-PCR检测结果
3．3NT2020-8株VP2及VP1基因遗传进化树分析结果
3．4NT2020-8株VP2及VP1部分基因编码氨基酸变异分析结果
3．5NT2020-8株同源性分析结果
3．7NP2104株全基因扩增结果
3．8NP2104株遗传进化分析结果
3．9NP2104株氨基酸序列分析结果
3．10NP2104株同源性分析结果
3．11鸡胚培养结果
3．12NP2104株动物回归实验结果
4讨论与小结
第三章不同表达系统表达传染性法氏囊病病毒VP2蛋白
1材料
1．2主要试剂配制
2实验方法
2．3VP2基因与原核表达载体链接
2．4原核表达重组质粒的小量诱导表达及鉴定
2．5重组转移载体pFast-Bac-1-GP67-VP2的构建
2．6杆状病毒转移载体转座DH10 Bac感受态细胞
2．7重组杆状病毒质粒的提取
2．9重组杆状病毒质粒转染sf9细胞
2．11重组杆状病毒表达鉴定
2．12重组杆状病毒表达条件优化
2．13重组杆状病毒大量表达及收获蛋白
3结果
3．2原核表达重组蛋白SDS-PAGE分析及最佳表达菌株的筛选
3．3原核表达重组蛋白Western Blot分析
3．4原核表达诱导表达条件优化
3．5大量诱导表达及包涵体提取效果
3．6杆状病毒转移载体pFast-Bac-1-GP67-VP2的酶切鉴定
3．7重组杆状病毒质粒的鉴定
3．8 P1代重组杆状病毒的收获及鉴定
3．9重组杆状病毒表达鉴定
3．10测定重组杆状病毒TCID50
3．11重组杆状病毒表达条件优化
3．12重组杆状病毒优化表达条件后蛋白表达结果
4讨论与小结
第四章两种VP2重组蛋白免疫原性比较
1材料
1．1试验动物
1．2毒株
2实验方法
2．1免疫原制备
2．4中和抗体检测
2．8荧光定量PCR方法检测法氏囊病毒载量及泄殖腔排毒量
3结果
3．1血清IFA抗体效价
3．2血清中和抗体效价
3．3血清琼扩抗体效价
3．4攻毒保护试验结果
3．5法氏囊组织病理学评价结果
3．6法氏囊病毒载量及肛拭子排毒量结果
4讨论与小结
全文结论
参考文献
致谢
扬州大学;
