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摘要
缩略词表
第一章文献综述
1.1禽呼肠孤病毒概述
1.1.1结构特征
1.1.2特性
1.1.3病毒蛋白及功能
1.1.4病毒增殖
1.1.5ARV诱导的细胞凋亡
1.2细胞未折叠蛋白反应
1.2.1经典信号通路
1.2.2ATF6蛋白
1.3研究目的与意义
第二章禽呼肠孤病毒感染激活宿主细胞UPR
2.1材料
2.1.1细胞、病毒
2.1.2主要试剂
2.1.3主要仪器
2.2方法
2.2.1ARV感染vero细胞RNA样品和蛋白样品的收集处理
2.2.2以细胞RNA样品为模板合成cDNA
2.2.3q-PCR检测细胞样品中UPR相关因子转录水平
2.2.4PCR检测细胞样品中XBP1分子mRNA剪接情况
2.2.5 Western blot检测细胞样品中UPR相关因子蛋白水平
2.2.6检测内质网应激抑制剂4-PBA抑制细胞UPR的效果
2.3结果
2.3.1ARV感染诱导vero细胞病变
2.3.2ARV感染细胞中UPR相关因子转录水平变化
2.3.3ARV感染细胞中XBPl分子mRNA剪接情况
2.3.4ARV感染细胞中UPR相关因子蛋白水平变化
2.3.54-PBA对UPR的抑制效果
2.4讨论
第三章抑制UPR对ARV增殖的影响
3.1材料
3.1.1细胞、病毒、菌株与质粒
3.1.2主要试剂
3.1.3主要仪器
3.2方法
3.2.14-PBA处理vero细胞对ARV复制的影响
3.2.2构建ATF6基因shRNA干扰慢病毒载体
3.2.3包装ATF6干扰重组慢病毒并检测效果
3.2.4ATF6-shRNA干扰慢病毒感染vero细胞对ARV复制的影响
3.3结果
3.3.1感染时间对ARV增殖的影响
3.3.2内质网应激抑制剂4-PBA对ARV增殖的影响
3.3.3构建ATF6基因shRNA干扰慢病毒载体
3.3.4ATF6-shRNA慢病毒的包装和效果检测
3.3.5shRNA介导干扰ATF6基因对ARV增殖的影响
3.4讨论
第四章抑制UPR对ARV诱导细胞凋亡的影响
4.1材料
4.1.1细胞、病毒
4.1.2主要试剂
4.1.3主要仪器
4.2方法
4.2.14-PBA处理vero细胞对ARV感染诱导细胞凋亡的影响
4.2.4Western blot检测细胞样品中Caspase-12和cleaved-Caspase-3蛋白水平
4.3结果
4.3.1ARV感染诱导的vero细胞凋亡情况
4.3.2ARV感染对Caspase-12和cleaved-Caspase-3蛋白水平的影响
4.3.3内质网应激抑制剂4-PBA对ARV感染诱导的细胞凋亡的影响
4.3.4shRNA介导干扰ATF6基因对ARV感染诱导的细胞凋亡的影响
4.4讨论
全文结论
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
扬州大学;