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细胞未折叠蛋白反应在禽呼肠孤病毒复制及诱导细胞凋亡中的作用研究

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第一章文献综述

1.1禽呼肠孤病毒概述

1.1.1结构特征

1.1.2特性

1.1.3病毒蛋白及功能

1.1.4病毒增殖

1.1.5ARV诱导的细胞凋亡

1.2细胞未折叠蛋白反应

1.2.1经典信号通路

1.2.2ATF6蛋白

1.3研究目的与意义

第二章禽呼肠孤病毒感染激活宿主细胞UPR

2.1材料

2.1.1细胞、病毒

2.1.2主要试剂

2.1.3主要仪器

2.2方法

2.2.1ARV感染vero细胞RNA样品和蛋白样品的收集处理

2.2.2以细胞RNA样品为模板合成cDNA

2.2.3q-PCR检测细胞样品中UPR相关因子转录水平

2.2.4PCR检测细胞样品中XBP1分子mRNA剪接情况

2.2.5 Western blot检测细胞样品中UPR相关因子蛋白水平

2.2.6检测内质网应激抑制剂4-PBA抑制细胞UPR的效果

2.3结果

2.3.1ARV感染诱导vero细胞病变

2.3.2ARV感染细胞中UPR相关因子转录水平变化

2.3.3ARV感染细胞中XBPl分子mRNA剪接情况

2.3.4ARV感染细胞中UPR相关因子蛋白水平变化

2.3.54-PBA对UPR的抑制效果

2.4讨论

第三章抑制UPR对ARV增殖的影响

3.1材料

3.1.1细胞、病毒、菌株与质粒

3.1.2主要试剂

3.1.3主要仪器

3.2方法

3.2.14-PBA处理vero细胞对ARV复制的影响

3.2.2构建ATF6基因shRNA干扰慢病毒载体

3.2.3包装ATF6干扰重组慢病毒并检测效果

3.2.4ATF6-shRNA干扰慢病毒感染vero细胞对ARV复制的影响

3.3结果

3.3.1感染时间对ARV增殖的影响

3.3.2内质网应激抑制剂4-PBA对ARV增殖的影响

3.3.3构建ATF6基因shRNA干扰慢病毒载体

3.3.4ATF6-shRNA慢病毒的包装和效果检测

3.3.5shRNA介导干扰ATF6基因对ARV增殖的影响

3.4讨论

第四章抑制UPR对ARV诱导细胞凋亡的影响

4.1材料

4.1.1细胞、病毒

4.1.2主要试剂

4.1.3主要仪器

4.2方法

4.2.14-PBA处理vero细胞对ARV感染诱导细胞凋亡的影响

4.2.4Western blot检测细胞样品中Caspase-12和cleaved-Caspase-3蛋白水平

4.3结果

4.3.1ARV感染诱导的vero细胞凋亡情况

4.3.2ARV感染对Caspase-12和cleaved-Caspase-3蛋白水平的影响

4.3.3内质网应激抑制剂4-PBA对ARV感染诱导的细胞凋亡的影响

4.3.4shRNA介导干扰ATF6基因对ARV感染诱导的细胞凋亡的影响

4.4讨论

全文结论

参考文献

攻读学位期间取得的研究成果

致谢

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著录项

  • 作者

    胡嘉澍;

  • 作者单位

    扬州大学;

  • 授予单位 扬州大学;
  • 学科 预防兽医学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 吴艳涛,张成成;
  • 年度 2021
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R73S85;
  • 关键词

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