彩绘蛋白胶结材料MALDI-TOF-MS分析及表征研究

摘要

彩绘文物是人类文明进步的遗产，具有非常重要的历史、考古、艺术和科学价值。保护和修复彩绘文物对中国、世界，乃至全人类有着十分重要的意义。彩绘颜料胶结材料的老化、降解等化学反应是彩绘文物受损的主要原因。本文采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (matrix-assisted laser desorption/ionization-time of flight-mass spectrometry，MALDI-TOF-MS)法对古代文物彩绘颜料胶结材料进行了蛋白质组学研究。研究了彩绘文物胶结材料中蛋白质的提取工艺，对比了5种试剂(NaOH、TFA、HCOOH、HCl及NH3-H2O)提取蛋白质的优劣，采用响应曲面法(RSM)优化古代彩绘文物胶结材料中蛋白质的超声辅助提取条件；进行了胶结材料鸡卵白蛋白的蛋白质组学研究；采用MALDI-TOF-MS法分析和表征了鸡卵白、鸡卵黄和动物胶及其彩绘颜料模拟样品，建立了鸡卵白、鸡卵黄和动物胶胶结材料的肽质量指纹图谱。结果表明：TFA被证明具有很大的应用前景，可用于胶结材料中蛋白质提取及MALDI-TOF-MS分析表征研究；TFA超声辅助提取鸡卵蛋白中蛋白质的最佳条件为TFA的浓度为0.53%，超声功率为50%，超声时间为40 min; TFA超声辅助提取动物胶中蛋白质的最佳条件为TFA的浓度为0.81%，超声功率为70%，超声时间为38.5 min;6种胶原蛋白在放养鸡卵白蛋白中被首次发现，8种胶原蛋白在笼养鸡卵白蛋白中被首次发现；EDTA可以有效络合颜料中的金属离子，释放出蛋白质；与朱砂相比，石绿中的铜离子和蛋白质中的氨基酸产生强络合作用，对蛋白质的表征影响较大。　　本论文包括五部分：　　第一章 绪论　　概述了彩绘文物胶结材料研究方法，介绍了质谱法的原理及其在胶结材料分析中的应用、蛋白质组学研究方法和策略，在此基础上提出了本课题的选题依据和研究内容。　　第二章 鸡卵白胶结材料中蛋白质的提取工艺研究　　研究了古代彩绘文物胶结材料中蛋白质的超声辅助提取条件，从五种不同的蛋白质提取剂(NaOH、TFA、HCOOH、HCl及NH3·H2O)中筛选出一种良好的提取剂，采用响应曲面法(RSM)优化了古代彩绘文物胶结材料中蛋白质的超声辅助提取条件。　　第三章 鸡卵白蛋白的蛋白质组学研究　　采用MALDI-TOF-MS法表征了放养鸡和笼养鸡卵白中的蛋白质。研究了胶结材料鸡卵白中蛋白质的酶解，主要考察了酶和底物的比例、酶解时间、酶解pH等三个因素对蛋白质酶解的影响。　　第四章 鸡卵及其模拟样品的MALDI-TOF-MS分析与表征　　研究了鸡卵白和鸡卵黄模拟样品中蛋白质的测定条件，干扰的消除方法，建立了鸡卵白、鸡卵黄及其模拟样品的肽质量指纹图谱。　　第五章 动物胶模拟样品中蛋白质的提取及MALDI-TOF-MS分析与表征　　采用响应曲面法(RSM)优化了动物胶胶结材料中蛋白质的TFA超声辅助提取条件，采用MALDI-TOF-MS法表征了动物胶及其模拟样品中蛋白质，建立了动物胶及其模拟样品的肽质量指纹图谱。

目录

第一个书签之前