2-甲氧基雌二醇(2ME2)对脂多糖所致急性肺损伤的保护作用

摘要

目的:观察在脂多糖所致急性肺损伤模型大鼠肺组织中低氧诱导分子-1α（hypoxia inducing factor-1α，HIF-1α）、核因子κB(Nuclear factorκB，NF-κB)、环氧合酶-2（cyclooxgenase-2，COX-2）表达的情况，并探讨2-甲氧基雌二醇（2-methoxyestradiol，2ME2）干预急性肺损伤的机制，以期为临床上急性肺损伤的治疗寻找到新的防治措施。　　方法:1.将体重(190±10)g的清洁健康雄性SD大鼠300只随机分成正常对照组、肺损伤模型组、肺损伤溶媒干预组、肺损伤2ME2低剂量干预组、肺损伤2ME2高剂量干预组。正常对照组气管穿刺注入生理盐水5mg/kg，余各组气管穿刺注入脂多糖(5mg/kg)复制急性肺损伤模型，溶媒干预组气管穿刺注入脂多糖后，腹腔注射二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)16mg/kg;低剂量2ME2干预组气管穿刺注入脂多糖后，腹腔注射2ME2(8mg/kg)+DMSO(16mg/kg);高剂量2ME2干预组气管穿刺注入脂多糖后，腹腔注射2ME2(16mg/kg)+DMSO(16mg/kg)。2.各组于注射脂多糖后的3、9、24小时随机抽取20只大鼠处死，检测大鼠股动脉氧分压(PaO2)，右肺湿／干重比例(W/D)。左心室采血离心后用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)检测血清中NF-κB、COX-2的浓度;取左上肺组织经4％多聚甲醛固定后，采用苏木素-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色在光镜下观察肺组织病理改变，用肺组织炎症评分评价各组大鼠肺组织炎症程度;同时留取左下叶肺组织行蛋白质免疫印记法(Western blot，WB)测定肺组织中HIF-1α蛋白的表达量，用统计学分析软件分析模型组大鼠血清中NF-κB和HIF-1α的相关性。3.统计学分析:所有数据均以(x)±s表示，并采用SPSS22.0统计软件进行分析，以P＜0.05为有统计学意义。　　结果:(1)模型组和溶媒组较对照组出现氧分压下降、肺湿干重比例增高、病理组织破坏、肺组织炎症评分增高，与对照组同一时间点存在统计学差异(P＜0.05)。低剂量组和高剂量2ME2干预组较对照组也出现氧分压下降、肺湿干重比例增高、病理组织破坏、肺组织炎症评分增高，但较溶媒组氧分压下降幅度低，肺湿干重比例增高幅度少、病理组织破坏程度轻、肺组织炎症评分增高幅度小，与溶媒组同一时间点存在统计学差异(P＜0.05)。而与低剂量2ME2干预组比，高剂量2ME2干预组各时间点氧分压稍高、肺湿干重比例较小、病理组织破坏轻、肺泡炎症评分增高程度低(P＜0.05)。(2)血清COX-2、NF-κB浓度:对照组各个时间点COX-2、NF-κB浓度都比较低。模型组和溶媒组血清COX-2、NF-κB浓度随时间逐渐上升后有所下降，于9小时达到最高，与对照组同一时间点存在统计学差异(P＜0.05)。低剂量组和高剂量组也出现COX-2、NF-κB浓度逐渐升高随后下降，但各个时间点较对照组高，较溶媒组低（P＜0.05）。与低剂量2ME2干预组比，高剂量2ME2干预组各时间点COX-2、NF-κB浓度更低(P＜0.05)。(3)HIF-1α含量:对照组于各个时间点HIF-1α蛋白表达低。模型组和溶媒组在3小时开始出现HIF-1α含量上升，9小时达到最高，与对照组同一时间点存在统计学差异(P＜0.05)。与溶媒组各个时间点比，低剂量2ME2干预组HIF-1α含量下降，高剂量2ME2干预组HIF-1α含量下降更低(P＜0.05)。(4)NF-κB和HIF-1α的相关性分析:NF-κB和HIF-1α的相关系数为r=0.995，两者存在明显相关。 结论:本研究发现脂多糖致急性肺损伤大鼠血清中HIF-1α、NF-κB、COX-2表达明显增高，可能参与了急性肺损伤的病理生理过程。而2ME2干预后，HIF-1α、NF-κB、COX-2表达下降，2ME2可能通过下调HIF-1α、NF-κB、COX-2表达减少体内炎症反应，对急性肺损伤起保护作用。

目录

摘要

前言

材料与方法

1．实验材料与仪器

2．实验方法

结果

1．血气分析

2．肺组织湿／干重比例

3．肺组织形态学

4．COX-2的浓度

5．NF-κB的浓度

6．HIF-1α蛋白表达

7．HIF-1α与NF-κB的相关性分析

讨论

1．急性肺损伤模型的建立

2．NF-κB／COX-2与急性肺损伤

3．HIF-1α／NF-κB与急性肺损伤

4．2ME2与急性肺损伤

结论

参考文献

英汉缩略词对照表

致谢

综述

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