温肺培元颗粒对免疫低下肺部感染小鼠模型T淋巴细胞亚群、IFN-γ、IL-4的影响

摘要

目的：建立免疫功能低下合并肺部感染小鼠模型，探讨温肺培元颗粒对免功能疫低下肺部感染模型小鼠外周血T细胞亚群和血清中IL-4、IFN-γ含量的影响，且探索温肺培元颗粒对免疫功能低下合并肺部感染的作用机理，为温肺培元颗粒进一步的临床推广应用提供实验依据。　　方法：①动物分组：将90只清洁级、健康、近交系BALB/C小鼠分9组。采用随机数字表法即：正常对照组、Friend鼠白血病病毒组、模型组、齐多夫定组、唐草片组、温肺培元颗粒加盐酸左氧氟沙星组（中西药组）、温肺培元颗粒高剂量组、温肺培元颗粒中剂量组、温肺培元颗粒低剂量组，每组平均为10只。②小鼠造模与用药：适宜性喂养小鼠3天后，各组小鼠每只腹腔注射配比好的FLV病毒的悬浊液0.5ml（除正常组外），而后观察21天。小鼠出现毛皮光泽欠佳、活动度减弱、尾骶部晦暗，腹部膨大（脾肿大）等体征。后采用滴鼻法对小鼠进行Ⅲ型肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae，S.pn）接种，每只每次约滴入50μl，观察7天。待建立免疫低下合并肺部感染模型成功后各治疗组给予相应药物与剂量进行干预，正常组、FLV组、模型组给予与药液同体积的生理盐水。③指标测定：每天观察并记录小鼠一般情况，末次给药后摘眼球取血处死小鼠，取胸腺，脾脏并计算其脏器指数；流式细胞术检测小鼠模型外周血中CD4+T、CD8+T细胞含量，计算CD4+T/CD8+T的比值；酶联免疫吸附（enzyme-linked immune sorbent assay, ELISA）法测定小鼠血清中IL-4及IFN-γ含量。　　结果：⑴成功复制免疫功能低下合并肺部感染小鼠模型；⑵小鼠一般情况比较结果：正常组毛发有光泽，活动饮食及体重均正常。FLV组与模型组毛发光泽度较差，毛发蓬乱现象严重，活动度逐渐下降，饮食饮水明显减少，体重下降。AZT组、唐草片组和温肺培元颗粒低剂量组毛发光泽欠佳，有竖毛现象，活动度逐渐下降，饮食饮水减少，体重变化不明显。中西药组、温肺培元颗粒高剂量组和温肺培元颗粒中剂量组毛发、活动度、饮食饮水量、体重与正常组相比均无显著改变；⑶小鼠体重比较结果：与正常组相比F LV组、模型组小鼠体重均降低，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与模型组相比AZT组、中西药组、温肺培元高剂量组小鼠体重均增加，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与FLV组相比AZT组、唐草片组、中西药组、温肺培元高剂量组小鼠体重均增加，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与AZT组相比温肺培元中剂量组、温肺培元低剂量组小鼠体重均降低，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与温肺培元高剂量组相比中剂量组小鼠体重降低，差异有统计学意义(P﹤0.05)。⑷脏器质量及脏器系数比较结果：胸腺质量：与正常组相比FLV组、模型组胸腺质量降低，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与模型组相比AZT组、唐草片组、中西药组、温肺培元高剂量组、温肺培元低剂量组胸腺质量均增加，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与FLV组相比AZT组、唐草片组、中西药组、温肺培元高剂量组、温肺培元中剂量组、温肺培元低剂量组胸腺质量均增加，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与AZT组相比模型组、温肺培元低剂量组胸腺质量均降低，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与温肺培元高剂量组相比温肺培元低剂量组胸腺质量下降，差异有统计学意义(P﹤0.05)㈩胸腺指数：与正常组相比FLV组、模型组胸腺指数降低，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与模型组相比AZT组、中西药组、温肺培元高剂量组、温肺培元中剂量组胸腺指数增加，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与FLV组相比AZT组、唐草片组、中西药组、温肺培元高剂量组、温肺培元中剂量组、温肺培元低剂量组胸腺指数增加，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与AZT组相比模型组、温肺培元低剂量组胸腺指数均降低，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与温肺培元高剂量组相比温肺培元低剂量组胸腺指数降低，差异有统计学意义(P﹤0.05㈩脾脏质量：与正常组相比FLV组、模型组脾脏质量降低，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与模型组相比AZT组、唐草片组、中西药组、温肺培元高剂量组、温肺培元低剂量组脾脏质量增加，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与FLV组相比AZT组、唐草片组、中西药组、温肺培元高剂量组、温肺培元中剂量组、温肺培元低剂量组脾脏质量增加，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与AZT组相比模型组、温肺培元低剂量组脾脏质量均降低，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与温肺培元高剂量组相比温肺培元低剂量组脾脏质量下降，差异有统计学意义(P﹤0.05)㈩脾脏指数：与正常组相比FLV组、模型组脾脏指数均降低，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与模型组相比AZT组、中西药组、高剂量组、温肺培元中剂量组脾脏指数均增加，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与FLV组相比AZT组、唐草片组、中西药组、温肺培元高剂量组、温肺培元中剂量组、温肺培元低剂量组脾脏指数均增加，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与AZT组相比模型组、温肺培元低剂量组脾脏指数均降低，差异有统计学意义(P﹤0.05)；与温肺培元高剂量组相比低剂量组脾脏质量降低，差异有统计学意义(P﹤0.05)。⑸小鼠模型外周血CD4+T、CD8+T淋巴细胞数量及CD4+T/CD8+T比值结果：模型组与正常对照组比较CD4+T、CD8+T有显著差异（P<0.05），并再次证明FLV病毒可以明显抑制小鼠T淋巴细胞数量。与模型组相比，用药后温肺培元颗粒高、中、低三个剂量组小鼠，CD4+T淋巴细胞水平及CD4+T/CD8+T比值显著升高，同时CD8+T淋巴细胞数量下降（P<0.05）；6.细胞炎症因子IL-4、IFN-γ检测结果：免疫功能低下合并肺部感染小鼠模型血清中IL-4、IFN-γ表达水平均较正常组上升(P﹤0.05)而较模型组明显下降(P﹤0.05)。　　结论：①成功复制免疫功能低下合并肺部感染小鼠模型并用于观察温肺培元颗粒对免疫功能低下合并肺部感染小鼠模型的影响；②温肺培元颗粒能够改善模型小鼠的一般情况，同时降低F LV病毒对小鼠的体重、脏器质量、脏器系数的影响，提示温肺培元颗粒可以有效地治疗并控制肺炎病毒感染；③温肺培元颗粒能够有效地改善小鼠外周血T淋巴细胞亚群的水平，提示温肺培元颗粒具有增强机体免疫功能的作用；④温肺培元颗粒能够有效的抑制了小鼠血清炎性因子IL-4及IFN-γ的表达，提示温肺培元颗粒具有一定的抗炎的作用。

目录

声明

前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

3 统计学处理

结果

1 各组小鼠模型症状体征等一般情况的变化

2 温肺培元颗粒对小鼠模型体重、胸腺、脾脏的影响

讨论

1 中西医学对免疫功能低下合并肺部感染的研究概况

2 免疫功能低下合并肺部感染的动物模型实验的相关研究

3 温肺培元颗粒组方及解析

4 实验结果分析

5 不足之处与未来展望

结论

致谢

参考文献

附 录1

附录2 小鼠外周血流式细胞图片

附录3综述：老年免疫低下合并肺部感染的中医治疗研究现状

附录 4在校期间论文论著和科研情况