复智胶囊对血管性痴呆大鼠认知功能障碍的影响及对mTOR信号通路的作用

摘要

目的：通过建立血管性痴呆（VD）大鼠模型，观察经复智胶囊干预后VD大鼠行为学的改变，及各组大鼠海马中大脑发育调节蛋白（drebrin）和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）的蛋白表达水平的变化，探讨复智胶囊改善VD的内在机制。　　方法：选取体重约（300±20）g的SPF级雄性SD大鼠36只，适应性喂养后在Morris水迷宫中对所有实验大鼠进行筛选，剔除不能完成行为学测评的大鼠。用excel随机数字表法将完成行为学测评的大鼠随机分为空白对照组和模型组，对模型组大鼠采用永久性双侧颈总动脉结扎（2-VO）手术以制备血管性痴呆模型。术后对存活的模型组大鼠再次进行行为学测评，有显著学习记忆障碍的即为造模成功的血管性痴呆大鼠模型，并用excel随机数字表法将其随机分为模型组、复智胶囊高剂量组、复智胶囊中剂量组、复智胶囊低剂量组、西药对照组安理申组。连续药物干预灌胃治疗30天后，在Morris水迷宫中对各组大鼠进行定位航行训练，并根据训练结果评定各组大鼠的学习记忆能力。行为学测试结束后将各组大鼠断头取脑，用免疫印迹法（western blot）测定海马中drebrin和mTOR蛋白的表达水平。　　结果：⑴Morris水迷宫实验结果：空白对照组和药物干预组大鼠的空间搜索策略大多是直线式，模型组大鼠则大多是边缘或随机式。在定位航行实验中，与空白对照组相比，VD模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长（P<0.01）；复智胶囊干预治疗后，与模型组相比，中药高、中、低剂量组VD大鼠的逃避潜伏期均有不同程度的缩短，差异均具有统计学意义(P<0.05)；与西药对照组相比，复智胶囊高剂量组VD大鼠的逃避潜伏期无明显差异（P>0.05)。⑵与空白对照组相比，VD模型组大鼠海马中drebrin蛋白的表达水平显著降低（P<0.01)；复智胶囊干预治疗后，与模型组相比，中药高、中、低剂量组VD大鼠海马中的drebrin蛋白表达水平均有不同程度的升高，差异均具有统计学意义(P<0.05)；与西药对照组相比，复智胶囊高剂量组VD大鼠海马中的drebrin蛋白表达水平无明显差异（P>0.05)。⑶与空白对照组相比，VD模型组大鼠海马中mTOR蛋白的表达水平明显升高（P<0.01)；复智胶囊干预治疗后，与模型组相比，中药高、中、低剂量组VD大鼠海马中的mTOR蛋白表达水平均有不同程度的降低，差异均具有统计学意义(P<0.05)；与西药对照组相比，复智胶囊高剂量组VD大鼠海马中的mTOR蛋白表达水平无明显差异（P>0.05)。　　结论：①通过2VO法制备脑组织长期慢性缺血缺氧导致的VD大鼠模型，经复智胶囊干预治疗，VD大鼠的认知功能障碍有效改善。②慢性缺血缺氧导致VD大鼠大脑海马神经元损伤，drebrin蛋白表达水平下降，在应用复智胶囊干预治疗后，神经元损伤减轻，学习记忆能力改善，该作用机制可能是通过复智胶囊调节机体mTOR信号通路、控制mTOR蛋白表达而实现的。

目录

声明

英文缩略词表

前言

材料与方法

1. 实验材料与方法

2. 实验方法

结果

1.复智胶囊对VD大鼠行为学的影响

2.western blot结果

讨论

1.复智胶囊治疗VD的理论探讨

2.复智胶囊对VD大鼠认知功能障碍的影响

3.复智胶囊对VD大鼠海马中drebrin蛋白表达的影响

4.复智胶囊对VD大鼠mTOR信号通路的影响

5.本实验所存在的问题及展望

结论

参考文献

致谢

附录1 附图

附录2 文献综述:血管性痴呆的中西医研究现状

附录3 在校发表论文及科研情况