声明
摘要
英文缩略词表
第一章文献综述
1.1禽呼肠孤病毒简介
1.1.1禽呼肠孤病毒的基本特征
1.1.2禽呼肠孤病毒的结构特征
1.1.3禽呼肠孤病毒的复制
1.1.4禽呼肠孤病毒的研究进展
1.1.5禽呼肠孤病毒主要蛋白的简介
1.2热休克蛋白及其与病毒相互作用的研究进展
1.2.1热休克蛋白HSP70及其与病毒相互作用的研究进展
1.2.2热休克蛋白HSP40及其与病毒相互作用的研究进展
1.3核糖体蛋白L4(RPL4)及其与病毒相互作用的研究进展
1.4免疫共沉淀技术在蛋白质研究中的应用
1.5本研究的目的意义
第二章禽呼肠孤病毒σA基因和禽源HSP70、HSP40、RPL4基因真核表达重组质粒的构建
2.1材料
2.1.1主要试验试剂
2.1.2主要试验仪器
2.1.3主要试验试剂的配置
2.1.4引物
2.2试验方法
2.2.1 pMD-18T-HSP70、pMD-18T-HSP40(DNAJB6)、pMD-18T-RPL4重组载体的构建
2.2.2 pMD-18T-σ A重组载体的构建
2.2.3 pEF1α-HA-σA、pEF1α-Myc-HSP70、pEF1α-Myc-HSP40(DNAJB6)、pEF1α-Myc-RPL4真核表达重组质粒的构建
2.3实验结果
2.3.1目的基因的PCR扩增结果
2.3.2目的基因连接pMD-18T的阳性克隆筛选结果
2.3.3真核表达重组质粒的阳性克隆筛选结果
2.3.4真核表达重组质粒的双酶切验证结果
2.4分析与讨论
第三章禽呼肠孤病毒σA蛋白和禽源HSP70、HSP40、RPL4蛋白的表达和验证
3.1材料
3.1.1试验材料
3.1.2主要试验试剂
3.1.3主要试验仪器
3.1.4主要试验试剂的配置
3.2试验方法
3.2.1间接免疫荧光验证目的蛋白的表达
3.2.2 Western blot验证目的蛋白的表达
3.3试验结果
3.3.1间接免疫荧光检测目的蛋白的表达结果
3.3.2 Western blot检测目的蛋白的表达结果
3.4分析与讨论
第四章禽呼肠孤病毒σA蛋白与禽源HSP70、HSP40、RPL4蛋白相互作用的验证
4.1材料
4.1.1主要试验试剂
4.1.2主要试验仪器
4.1.3主要试验试剂的配置
4.2试验方法
4.2.1免疫共沉淀(Co-IP)
4.2.2 Western blot检测蛋白的相互作用
4.3试验结果
4.4分析与讨论
全文结论
参考文献
致谢
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