纳米银与富里酸对AL细胞毒性及RNS/ROS产生影响的研究

摘要

随着纳米技术的不断发展，纳米材料潜存的对生态环境的危害引起了人们越来越多的关注。由于纳米银(nAg)具有良好的金属特性和抗菌性能，在医疗器械，电子元件及日常生活中有着广泛应用。由于nAg的广泛使用，人们对nAg进入生态环境中安全性问题十分担心。富里酸(FA)在水环境中普遍存在，由于FA具有多种功能基团，它可能会和nAg相互作用，进而引起nAg生物毒性的改变。
　　因此，本文探讨nAg和环境因子FA与nAg的复合体系对AL细胞毒性与RNS/ROS产生的影响。利用ALamar Blue法和RNS/ROS荧光特异性探针，本研究探讨了不同浓度纳米银(nAg，0.1～5μg/ml)、银离子(Ag+，0.01～0.5μg/ml)及在纳米银与富里酸(FA，10μg/ml)协同作用下对人鼠杂交瘤(AL)细胞增殖及活性氮/活性氧自由基产生的影响及在这一过程中的作用。结果显示:在低浓度(小于等于1μg/ml)情况下，nAg对AL细胞毒性作用主要来自于nAg释放的银离子(Ag+)，Ag+通过诱导胞内RNS的产生，进而产生增殖抑制作用;在高浓度(5μg/ml)情况下，nAg对AL细胞毒性作用主要来自于Ag+诱导的RNS和nAg本身诱导ROS二者共同的作用。模似水环境中存在的FA(10μg/ml)能够显著降低nAg和Ag+对AL细胞增殖抑制作用，并且能显著降低nAg和Ag+引起的AL细胞内RNS和ROS升高作用。

目录

声明

摘要

第一章 绪论

1．1 引言

1．2 纳米银简介

1．2．1 纳米技术发展简介

1．2．2 纳米材料和纳米银在水环境中的迁移与归趋

1．2．3 纳米银的性质和应用

1．2．4 纳米银的制备

1．2．5 纳米银在细胞中毒性研究及致毒机制

1．3 富里酸简介

1．4 自由基的简介

1．5 AL细胞的应用

第二章 nAg中释放Ag+的测定

2．1 引言

2．2 材料与方法

2．2．1 实验材料

2．2．2 实验仪器

2．3 实验方法

2．3．1 纳米银溶液中释放的银离子测定

2．4 结果与讨论

第三章 nAg和Ag+对AL细胞增殖的影响

3．1 引言

3．2 材料与方法

3．2．1 细胞

3．2．2 试剂

3．2．3 试剂配制

3．2．4 实验器材

3．3 实验方法

3．3．1 钠米银、硝酸银溶液的制备

3．3．2 细胞的培养

3．3．3 ALamar Blue分析方法

3．3．4 数据的处理

3．4 结果与讨论

第四章 nAg和Ag+对AL细胞RNS的影响

4．1 引言

4．2 材料与方法

4．2．1 细胞

4．2．2 试剂

4．2．3 试剂配制

4．2．4 实验器材

4．3 实验方法

4．3．1 钠米银、硝酸银溶液的制备

4．3．2 细胞的培养

4．3．3 RNS的检测方法

4．3．4 统计学分析

4．4 结果与讨论

第五章 nAg和Ag+对AL细胞ROS的影响

5．1 引言

5．2 材料与方法

5．2．1 细胞

5．2．2 试剂

5．2．3 试剂配制

5．2．4 实验器材

5．3 实验方法

5．3．1 钠米银、硝酸银溶液的制备

5．3．2 细胞的培养

5．3．3 ROS的检测方法

5．3．4 统计学分析

5．4 结果与讨论

第六章 FA与nAg的复合体系对AL细胞增殖和ROS／RNS产生的影响

6．1 引言

6．2 实验材料和方法

6．2．1 细胞

6．2．2 试剂

6．2．3 试剂配制

6．2．4 实验器材

6．3 实验方法

6．3．1 nAg、FA与nAg的复合体系的制备

6．3．2 细胞的培养

6．3．3 ALamar Blue分析、RNS／ROS的检测

6．3．4 统计学分析

6．4 结果与讨论

第七章 总结

参考文献

附录

致谢

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