MSC旁分泌TGF--β通过ERK1/2信号通路诱导黑色素瘤EMT的作用研究

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声明

摘要

英文缩写对照表

前言

材料与方法

一、实验动物

(一)仪器和设备

(二)所需主要试剂

(三)实验中主要试剂的配制

三、主要实验方法和操作步骤

(一)间充质干细胞MSC原代培养

(二)MSC CM获取及处理

(三)细胞划痕实验

(四)细胞侵袭实验

(五)酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)

(六)黑色素瘤肺部转移小鼠模型构建

(七)苏木精-伊红染色(Hematoxylin-eosin staining，HES)

(八)皮下肿瘤移植模型

(九)免疫荧光(Immunofluorescence，IF)

(十)蛋白免疫印迹(Western Blot)

(十一)实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time polymerase chain reaction，Q-PCR)

(十二)数据统计(Statistical analysis)

实验结果

一、间充质干细胞培养基(MSC CM)明显增加B16黑色素瘤细胞的上皮间质转化(EMT)

(一)MSC CM增强B16细胞的迁移和侵袭能力

(二)MSC增加B16细胞的肺转移灶

(三)MSC CM诱导B16细胞发生上皮间质转化EMT

二、间充质干细胞培养基(MSC CM)旁分泌TGF-β诱导黑色素瘤细胞发生上皮间质转化

(一)TGF-β诱导B16细胞发生上皮间质转化

(二)TGF-β介导MSC CM体外诱导B16细胞发生上皮间质转化

(三)TGF-β介导MSC CM体内诱导B16细胞发生上皮间质转化

三、Extracellular regulated protein kinases(ERK1／2)介导TGF-β诱导黑色素瘤细胞发生上皮间质转化

(二)TGF-β诱导B16细胞中p38 MAPK、ERK1／2磷酸化和炎症反应增加

(三)ERK1／2介导TGF-β诱导B16细胞发生上皮间质转化

讨 论

课题创新和不足之处

结 论

参考文献

综述

致谢