海风藤酮治疗乳腺癌骨转移的相关机制研究

摘要

骨转移是乳腺癌患者肿瘤发展的终末期。多达70％的BC患者在尸体解剖时可见骨转移灶。骨转移病灶主要是溶骨性的，因为BC细胞可以调节骨肿瘤微环境。乳腺癌细胞分泌的细胞因子可以进一步促进破骨细胞分化成熟，促进破骨活动，破骨细胞活动增强可释放更多的因子刺激乳腺癌细胞，进一步促进乳腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力，进一步促进转移病灶的发展。形成一个“恶性循环”。目前治疗BC骨转移的策略主要集中在打破这种“恶性溶骨循环”。绝大多数乳腺癌产生溶骨性骨转移。该过程的特征在于过度活化的破骨细胞形成和随后的骨破坏。BC细胞在定植于骨之后，甚至之前，可形成一个复杂的多基因程序性“恶性溶骨循环”，重塑骨微环境，促进癌症发展。IL-6，PTHRP（甲状旁腺激素相关蛋白）和TNFα（肿瘤坏死因子α）等BC细胞分泌的细胞因子可刺激成骨细胞，上调RANKL/OPG（骨保护素）比例，从而进一步刺激髓系破骨细胞前体细胞的分化。同时其他细胞因子如IL-11（白细胞介素11）和OPN（骨桥蛋白）也能直接促进其向破骨细胞分化。活化的破骨细胞降解骨基质，并释放主要储存在骨基质中的TGFβ（转化生长因子β），BMPs（骨形态发生蛋白）和IGFs（胰岛素样生长因子），反过来，促进BC进展。　　有研究已经证明了乳腺癌细胞系中PAF及其受体PTAFR的表达。在肿瘤微环境中，PAF由浸润的炎症细胞和肿瘤细胞本身分泌和积累，形成自分泌循环。PTAFR是G蛋白偶联受体(GPCR)。PAF/PTAFR信号通路激活导致复杂的细胞反应，包括细胞运动的增加，IL-6（白细胞介素6）和MMP（基质金属蛋白酶）表达的上调以及NF-κB信号的激活。迁移能力的增加是癌细胞形成转移性病变的重要特征，包括骨转移。已发表的文献和我们的结果都揭示了PAF处理后乳腺癌细胞的迁移能力增加。　　在本实验中，我们首先通过生物信息学分析提供了PAF/PTAFR信号通路在调节BC骨转移和破骨细胞生成中起重要作用的线索。　　在目前的研究中，我们证明PAF可以促进BC细胞迁移并诱导BMMs分化。海风藤酮可以减弱这两个过程，并且表现出很小的细胞毒性，可以被认为是BC骨转移的潜在治疗剂。与“恶性溶骨循环”相比，PAF能够通过两种平行方式促进BMMs分化为破骨细胞。一方面，PAF能刺激BC细胞上调IL-6，IL-11，MMPs和NF-κB等下游信号，进一步激活破骨细胞生成。另一方面，PAF也可以直接激活BMMs分化成破骨细胞。另一方面，PAF也可以直接激活BMMs分化成破骨细胞。在目前的研究中，我们证明了海风藤酮可以抑制BC诱导或PAF直接刺激破骨细胞生成。海风藤酮处理后破骨细胞分化标记的表达均下调。这个过程主要是由于NF-κB激活的抑制。　　总之，海风藤酮可能是一种有效的策略，通过阻断PAF/PTAFR信号通路，减弱乳腺癌形成的溶骨性骨转移。

目录

声明

摘要

缩略词表

前言

第一部分 PTAFR在乳腺癌及单核细胞中的表达

一、研究方法

二、结果

三、讨论

四、结论

第二部分 PAF抑制剂海风藤酮在乳腺癌骨转移及骨破坏中的潜在治疗作用

一、主要试剂和材料

二、实验方法

三、结果

四、讨论

五、结论

第三部分 海风藤酮抑制乳腺癌骨转移及骨破坏中的相关机制研究

一、实验方法

二、结果

三、讨论

四、结论

全文总结

文献综述

参考文献

在读期间发表论文和参加科研工作情况

致谢