论文说明
声明
摘要
符号说明
1．1．1抗衰老概述
1．1．2抗衰老研究进展
1．2NAMPT基因
1．2．1NAMPT基因
1．2．2NAMPT基因与抗衰老研究进展
1．3脐带间充质干细胞外泌体
1．3．1外泌体
1．3．2脐带间充质干细胞来源外泌体
1．3．3脐带间充质干细胞外泌体抗衰老的研究进展
1．4人皮肤成纤维细胞与抗衰老研究
1．5秀丽隐杆线虫与抗衰老研究
1．6研究目的与意义
第2章过表达NAMPT基因的脐带间充质干细胞及其外泌体的构建和鉴定
前言
2．1材料
2．1．1实验材料
2．1．2主要试剂
2．1．3主要仪器
2．1．4主要试剂配制
2．1．5相关的引物合成
2．2实验方法
2．2．1构建NAMPT过表达载体
2．2．2慢病毒包装及感染hUCMSC
2．2．3过表达NAMPT基因的hUCMSC细胞系的鉴定
2．2．4外泌体提取与鉴定
2．3结果与分析
2．3．1NAMPT转基因hUCMSC细胞系的鉴定
2．3．2NAMPT转基因的外泌体鉴定
2．4讨论
2．5小结
第3章过表达NAMPT基因脐带间充质干细胞外泌体对人皮肤成纤维细胞的影响
前言
3．1材料
3．1．1实验材料
3．1．2主要试剂
3．1．3主要仪器
3．1．4引物合成
3．2实验方法
3．2．1实验分组
3．2．2细胞计数
3．2．3外泌体浓度测定
3．2．4细胞生长曲线观察
3．2．5细胞划痕观察
3．2．6β-半乳糖苷酶染色观察
3．2．7MDA含量检测
3．2．8荧光定量PCR检测HSF细胞内p16和p21mRNA表达量
3．2．9Western blot检测HSF细胞内p16和p21蛋白表达量
3．3结果与分析
3．3．2过表达NAMPT基因的hUCMSC-Exos促进HSF细胞迁移
3．3．4过表达NAMPT基因的hUCMSC-Exos减少HSF细胞内MDA含量
3．3．5过表达NAMPT基因的hUCMSC-Exos降低HSF细胞内p16和p21mRNA的表达量
3．3．6过表达NAMPT基因的hUCMSC-Exos降低HSF细胞内p16和p21蛋白表达量
3．4讨论
3．5小结
第4章过表达NAMPT基因的脐带间充质干细胞外泌体对秀丽隐杆线虫抗衰老的影响
前言
4．1材料
4．1．1实验材料
4．1．2主要试剂
4．1．3主要仪器
4．1．4试剂配制
4．2实验方法
4．2．2秀丽隐杆线虫冻存与复苏
4．2．3秀丽隐杆线虫同期化处理
4．2．4实验分组
4．2．5ROS含量检测选择外泌体最佳处理浓度
4．2．6寿命实验
4．2．7身体摆动频率测定
4．2．8活性氧自由基ROS测定
4．2．9超氧化物歧化酶SOD含量检测
4．3结果与分析
4．3．1选取外泌体最佳处理量
4．3．3过表达NAMPT基因的hUCMSC-Exos加快秀丽隐杆线虫身体摆动频率
4．3．4过表达NAMPT基因的hUCMSC-Exos减少秀丽隐杆线虫体内ROS含量
4．3．5过表达NAMPT基因的hUCMSC-Exos增加秀丽隐杆线虫内SOD含量
4．4讨论
4．5小结
全文总结
结语
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
扬州大学;
