声明
摘要
中英文缩略词
第一章文献综述
1．1马铃薯甲虫概述
1．2类胰岛素通路
1．2．1类胰岛素
1．2．2类胰岛素受体
1．2．3胰岛素受体底物
1．2．4 3-磷酸肌醇激酶
1．2．5生长因子受体结合蛋白2
1．2．6Chico介导的下游通路
1．3 IIS／TOR信号通路的功能
1．3．1IIS／TOR信号通路对20E的调控
1．3．2IIS／TOR信号通路对JH的调控
1．3．3IIS／TOR信号通路对摄食量调控
1．3．4IIS／TOR信号通路对生殖的调控
1．3．5IIS／TOR信号通路对生长和发育的调控
1．3．6IIS／TOR信号通路对寿命的调控
1．3．7 IIS／TOR信号通路其他功能
1．4本研究的目的和意义
第二章类胰岛素转导途径关键基因的鉴定
2．1材料和方法
2．1．1昆虫饲养和实验材料
2．1．2目的基因的获取
2．1．3马铃薯甲虫总I矾A的提取
2．1．4cDNA第一链合成
2．1．5引物设计
2．1．6目的基因的克隆
2．1．7PCR产物的回收纯化
2．1．8质粒载体的连接和转化
2．1．9测序
2．1．10生物信息学分析
2．2结果与分析
2．2．1 Ldchico的克隆与分析
2．2．2 Ldpi3k92E的克隆与分析
2．2．3 Lddrk的克隆与分析
2．3讨论
第三章敲低Ldchico影响马铃薯甲虫幼虫变态
3．1材料和方法
3．1．1昆虫饲养和实验材料
3．1．2dsRNA合成
3．1．3生物测定
3．1．4实时荧光定量PCR
3．1．5游离氨基酸的测定
3．1．6海藻糖、葡萄糖和糖原含量分析
3．1．7数据分析
3．2结果与分析
3．2．2 Ldchico和Ldpi3k92E的时空表达谱
3．2．3敲低Ldchico影响化蛹和羽化
3．2．4敲低Ldchico或Ldpi3k92E影响氨基酸的吸收
3．2．5敲低Ldchico或Ldpi3k92E对糖代谢的影响
3．2．6敲低Ldchico或Ldpi3k92E对激素的影响
3．2．7喂食20E和JH对敲低Ldchico和Ldpi3k92E的幼虫的回补效应
3．3讨论
3．3．2敲低chico或者pi3k通过扰乱JH信号影响幼虫个体大小
3．3．3Chico通过非PI3K途径影响变态
第四章敲低Lddrk影响马铃薯甲虫幼虫变态
4．1材料和方法
4．1．1昆虫饲养和实验材料
4．1．2dsRNA合成
4．1．3生物测定
4．1．4实时荧光定量PCR
4．1．5海藻糖、葡萄糖和糖原的含量分析
4．1．6数据分析
4．2结果
4．2．2 Lddrk和8种代表性的RTK基因的表达
4．2．3敲低Lddrk、Ldchico或Lddrk+Ldchico影响化蛹
4．2．4敲低Lddrk、Ldchico或Lddrk+Ldchico影响食物摄取量和营养代谢
4．2．5敲低Lddrk、Ldchico或Lddrk+Ldchico抑制20E信号通路
4．2．6 20E对摄食dsdrk的四龄幼虫的回补效应
4．3讨论
4．3．2敲低drk扰乱20E信号来阻碍化蛹
4．3．3敲低drk抑制USP表达以影响化蛹
第五章RNA干扰sNPF影响马铃薯甲虫摄食量
5．1材料及方法
5．1．1马铃薯甲虫的饲养及实验材料处理
5．1．2目标基因的获得
5．1．3分子克隆和dsRNA合成
5．1．4生物测定
5．1．5实时荧光定量PCR
5．1．6数据分析
5．2结果
5．2．3马铃薯甲虫LdsNPF基因的克隆和分析
5．2．4马铃薯LdsNPF基因的时空表达谱
5．2．5敲低LdsNPF影响马铃薯甲虫摄食量
5．2．6敲低LdsNPF对IIS／TOR信号通路的影响
5．3讨论
全文总结
参考文献
附录
致谢
攻读博士学位期间发表的相关学术论文
南京农业大学;
