声明
摘要
1前言
1．1镉简介
1．2镉的吸收与代谢
1．3镉污染的来源与途径
1．4镉的危害
1．5镉对肠道的损伤作用
1．6镉与氧化应激
1．7镉与钙稳态
1．7．1Ca2+的生物学作用
1．7．2内质网钙信号转导相关通路
1．8镉与内质网应激
1．9镉与程序性坏死
1．10镉与炎症反应
1．11镉与热休克蛋白
1．12研究的目的与意义
2材料方法
2．2．1主要仪器
2．2．2主要试剂
2．3氯化镉的配制
2．4猪粪便、血液样品的采集
2．5猪粪便及血液的镉含量检测
2．6猪镉中毒试验的总体设计
2．6．1猪镉中毒试验技术路线图
2．6．2猪的分组与处理
2．6．3样品的采集与处理
2．7检测项目与方法
2．7．1试验猪临床症状观察
2．7．2回肠组织显微结构观察
2．7．3回肠组织超微结构观察
2．7．4回肠组织氧化应激标志物的测定
2．7．5猪回肠总RNA的提取及目的基因mRNA表达水平检测
2．7．6猪回肠组织蛋白表达的检测
2．8细胞试验的总体设计
2．8．2 IPEC-J2细胞培养
2．8．4IPEC-J2细胞分组与处理
2．9检测项目与方法
2．9．5IPEC-J2细胞钙浓度检测
2．10试验应用网站网址
2．11数据分析与统计
3结果与分析
3．1猪粪便及血液中镉含量测定
3．2猪镉中毒试验结果
3．2．1镉对猪精神状态的影响
3．2．2镉对仔猪体重的影响
3．2．3猪回肠显微结构
3．2．4猪回肠超微结构观察
3．2．5镉对猪回肠氧化应激状态的影响
3．2．6镉处理的富集通路生物信息学分析及影响相关基因的预测
3．2．7镉处理对猪回肠钙稳态的影响
3．2．8镉对猪回肠内质网应激的影响
3．2．9镉处理猪回肠中钙与内质网应激的相关性分析
3．2．10镉对猪回肠中程序性坏死相关基因mRNA和蛋白表达的影响
3．2．11镉对猪回肠中炎症相关因子mRNA和蛋白表达的影响
3．2．12镉对猪回肠热休克蛋白相关基因mRNA和蛋白表达的影响
3．3IPEC-J2细胞镉中毒的试验结果
3．3．2镉对IPEC-J2细胞IC50的测定结果
3．3．5镉对IPEC-J2细胞的氧化与抗氧化状态的影响
3．3．6镉处理对IPEC-J2细胞内钙稳态的影响
3．3．7镉处理对IPEC-J2细胞内质网应激相关基因mRNA和蛋白表达的影响
3．3．8GSKl016790A对镉诱导IPEC-J2细胞的钙稳态失衡和内质网应激的调控作用
3．3．9镉处理对IPEC-J2细胞程序性坏死相关基因mRNA和蛋白表达的影响
3．3．10镉处理对IPEC-J2细胞炎症因子相关基因mRNA和蛋白表达的影响
3．3．11镉处理对IPEC-J2细胞热休克蛋白相关基因mRNA和蛋白表达的影响
4讨论
4．1哈尔滨市周边猪场粪便镉污染调查情况
4．2试验处理条件的确定
4．2．1仔猪镉暴露处理条件的确定
4．2．2IPEC-J2细胞氯化镉暴露处理条件的确定
4．4镉对猪回肠和IPEC-J2细胞氧化应激的影响
4．5镉对猪回肠和IPEC-J2细胞钙稳态的影响
4．7镉对猪回肠和IPEC-J2细胞程序性坏死的影响
4．8镉对猪回肠和IPEC-J2细胞炎症反应的影响
5结论
致谢
参考文献
附录
攻读博士学位期间发表的学术论文
东北农业大学;
