树突状细胞靶向RNA脂质体疫苗的制备及抗肝癌作用研究

目录

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缩略词对照表

第一章 绪论

1.1 肿瘤免疫的研究与发展

1.2 肿瘤疫苗的研究与发展

1.3 基于纳米技术的RNA LNPs 肿瘤疫苗

1.4 课题的目的及意义

第二章 RNA LNPs的制备和表征

2.1 引言

2.2 实验材料与仪器

2.2.1细胞株

2.2.2 实验材料

2.2.3 实验仪器

2.2.4 细胞培养溶液的配制

2.2.5 Lip-1溶液的配制

2.2.6 1%琼脂糖凝胶的配制

2.3 实验方法

2.3.1 细胞培养实验

2.3.2 RNA提取及鉴定实验

2.3.3 RNALNPs-1的制备及表征实验

2.3.4 RNALNPs-2的制备及表征实验

2.4 结果与讨论

2.4.1 LNPs-1的粒径、电位测定

2.4.2 LNPs-1的稳定性研究

2.4.3 RNA LNPs-1的粒径、电位测定

2.4.4 RNALNPs-1的完整性研究

2.4.5 LNPs-2的粒径、电位测定

2.4.6 LNPs-2的稳定性研究

2.4.7 RNA LNPs-2的粒径、电位测定

2.4.8 RNALNPs-2的完整性研究

2.5 本章小结

第三章 RNA LNPs疫苗体内抗肝癌作用的研究

3.1 引言

3.2 实验材料与仪器

3.2.1 细胞株

3.2.2 实验动物

3.2.3 实验材料

3.2.4 实验仪器

3.2.5 细胞培养溶液的配制

3.3 实验方法

3.3.2 DC的分离培养

3.3.3 负载肝癌细胞RNALNPs 的肿瘤疫苗制备

3.3.4 RNALNPs 肿瘤疫苗对DC细胞活性的影响

3.3.5负载肝癌细胞RNALNPs 的DC表面抗原呈递相关分子的表达情况

3.3.6 CD8+ T 细胞的分离培养及鉴定

3.3.7 负载肝癌细胞RNALNPs肿瘤疫苗刺激自身淋巴细胞增殖能力检测

3.3.8负载肝癌细胞RNALNPs 肿瘤疫苗活化的CTL 的制备

3.3.9负载肝癌细胞RNALNPs 肿瘤疫苗活化的CTLs 体外杀伤肝癌细胞的作用

3.4 结果与讨论

3.4.1 RNALNPs 肿瘤疫苗对DC毒性的影响

3.4.2负载肝癌细胞RNALNPs 肿瘤疫苗的DCs 表面抗原呈递相关分子的表达情况

3.4.3 CD8+T 细胞的分离及鉴定

3.4.4负载肝癌细胞RNALNPs 肿瘤疫苗活化CD8+T 淋巴细胞功能检测

3.4.5 Hepa1-6-RNALNPs-CTLs 体外杀伤Hepa1-6细胞的作用

3.5 本章小结

第四章 RNA LNPs疫苗体内抗肝癌作用的研究

4.1引言

4.2 实验材料与仪器

4.2.1 实验动物

4.2.2 实验材料

4.2.3 实验仪器

4.3 实验部分

4.3.1 RNA LNPs 肿瘤疫苗的预防效果

4.3.2 RNALNPs 肿瘤疫苗的治疗效果

4.3.3统计学分析

4.4 结果与讨论

4.4.1 RNALNPs 疫苗的预防效果

4.4.2 RNALNPs 疫苗的抑制作用

4.5 本章小结

总结

讨论

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表的学术论文