声明
第一章 文献综述
1.1 植物对病原菌的免疫机制
1.2.1 基因对基因模型
1.2.2 植物中的抗病基因
1.2.3 病原菌的无毒基因
1.2.4 R蛋白与 Avr蛋白识别机制
1.3 小麦条锈病
1.3.1 小麦条锈病的危害
1.3.2 小麦条锈菌
1.3.3 小麦条锈菌的生活史与病害循环
1.3.4 小麦条锈菌的毒性变异
1.3.5 小麦条锈菌的危害
1.4 小麦条锈菌致病机理研究
1.4.1 小麦条锈菌基因组测序
1.4.2 锈菌的致病因子
1.4.3 小麦条锈菌的效应蛋白
1.5 本研究的目的意义
1.5.1 研究内容
第二章 候选无毒基因 AvrYr26 的筛选
2.1 引言
2.2 试验材料与方法
2.2.1 条锈菌的收集与扩繁
2.2.2 毒性鉴定
2.2.3 基因组 DNA的提取
2.2.4 重测序
2.2.5 转录组
2.3.1 菌种的收集与鉴定
2.3.2 重测序数据概述
2.3.3 变异位点检测
2.3.4 菌株的聚类分析与进化关系
2.3.5 候选无毒基因 AvrYr26的鉴定
2.3.6 转录组筛选
2.4 结论与讨论
第三章 条锈菌角质酶效应蛋白 Pst22751 功能分析
3.1 引言
3.2.1 实验材料
3.2.2 样品总 RNA的提取与 cDNA模板的合成
3.2.3 序列分析与进化树分析
3.2.4 角质酶基因表达量分析
3.2.5 农杆菌瞬时表达
3.2.6 基因枪介导的小麦瞬时表达
3.2.7 角质酶酶活测定
3.2.8 亚细胞定位
3.2.9 荧光假单胞菌介导的三型分泌系统过表达
3.2.10 病毒诱导的基因沉默（BSMV-HIGS）
3.2.11 扫描电子显微镜产孢观察实验
3.3 结果与分析
3.3.1 角质酶基因的鉴定
3.3.2 基因结构与进化树分析
3.3.3 小麦条锈菌角质酶基因表达量分析
3.3.4 角质酶 Pst22751 的亚细胞定位
3.3.5 角质酶 Pst22751 的酶活
3.3.6 角质酶 Pst22751 能够抑制 BAX和 Pst322引起的细胞死亡
3.3.7 细菌三型分泌系统过表达 Pst22751
3.3.8 病毒介导的 HIGS
3.4 结论与讨论
第四章 GSREs类效应蛋白PstGSRE1保守基序PstGSRE1-m9的功能分析
4.1 引言
4.2.1 实验材料
4.2.2 农杆菌瞬时表达
4.2.3 蛋白 Western blot 实验
4.2.4 酵母双杂交实验
4.2.5 三型分泌系统实验
4.2.6 GST Pull-down 实验
4.2.7 免疫共沉淀（Co-IP）实验
4.2.8 烟草细胞共定位分析
4.2.9 PstGSRE1 与 TaLOL2 互作机理探究
4.3 结果与分析
4.3.1 PstGSRE1-m9能够抑制 BAX 和 Pst322 引起的细胞死亡
4.3.2 三型分泌系统过表达 PstGSRE1-m9 能够干扰植物 PTI与 ETI反应
4.3.3 酵母双杂交验证 PstGSRE1-m9 与 TaLOL2 及其突变体互作
4.3.4 体外 Pull-down 实验验证 PstGSRE1-m9 与 TaLOL2互作
4.3.5 体内免疫共沉淀（Co-IP）验证 PstGSRE1-m9 与 TaLOL2 互作
4.3.6 PstGSRE1-m9与 TaLOL2 的共定位分析
4.3.7 PstGSRE1 对 TaLOL2 的调控机制
4.4 讨论与结论
第五章 非典型分泌蛋白 PstHMG1 功能分析
5.1 引言
5.2.1 实验材料
5.2.2 样品总 RNA的提取与 cDNA模板的合成
5.2.3 序列分析与进化树分析
5.2.4 PstHMG1 的表达分析
5.2.5 共杆菌介导的烟草瞬时表达
5.2.6 基因枪介导的小麦瞬时表达
5.2.7 PstHMG1 的亚细胞定位
5.2.8 PstHMG1 的胞间液提取
5.2.9 扫描电子显微镜实验
5.2.10 免疫胶体金
5.2.11 PstHMG1 病毒介导的 HIGS
5.3 结果与分析
5.3.1 PstHMG1 的鉴定
5.3.2 PstHMG1 的进化分析
5.3.3 PstHMG1 的基因表达分析
5.3.4 PstHMG1 能够引起细胞坏死
5.3.5 PstHMG1 降解 DNA分析
5.3.6 PstHMG1 烟草中的亚细胞定位
5.3.7 PstHMG1 的分泌验证
5.3.8 PstHMG1 的免疫胶体金
5.3.9 PstHMG1 的 HIGS
5.4 结论与讨论
第六章 全文总结与展望
6.1 全文总结
6.2 展望
参考文献
附录一
附录二
附录三
致 谢
个人简历
西北农林科技大学;
