宿主Rab22a与CSFV NS4B蛋白相互作用及对CSFV复制增殖的影响

目录

声明

第一章 猪瘟病毒及Rab蛋白研究进展

1.1 CSFV研究进展

1.1.1 CSFV概述

1.1.2 CSFV结构蛋白

1.1.3 CSFV非结构蛋白

1.1.4 病毒与宿主相互作用

1.1.5 CSFV的传播和致病作用

1.2 病毒的胞内转运

1.3 Rab蛋白研究进展

1.3.1 Rab蛋白概述

1.3.2 Rab GTPase

1.3.3 Rab蛋白活性的调节

1.3.4 Rab蛋白与病毒入侵、复制和增殖

1.3.5 Rab22a蛋白

第二章 Rab22a与NS4B蛋白相互作用的研究

2.1 材料

2.1.1 病毒、细胞和主要试剂

2.1.2 仪器设备

2.2 方法

2.2.1 构建Rab22a真核表达载体

2.2.2 表达并验证pGEX-GST-Rab22a

2.2.3 转染融合表达载体并进行结果验证

2.2.4 免疫共沉淀对Rab22a与NS4B的结合情况进行检测

2.2.5 GST pull-down试验

2.2.6 激光共聚焦验证Rab22a与NS4B的相互作用

2.3 结果

2.3.1 载体的鉴定

2.3.2 原核重组质粒表达优化和鉴定

2.3.3 验证真核重组质粒是否表达

2.3.4 Co-IP验证Rab22a与NS4B的相互作用

2.3.5 GST pull-down验证Rab22a与NS4B的相互作用

2.3.6 激光共聚焦验证Rab22a与NS4B的相互作用

2.4 讨论

2.5 小结

第三章 Rab22a对CSFV复制增殖的影响

3.1 材料

3.1.1病毒、细胞和主要试剂

3.1.2 仪器设备

3.2 方法

3.2.1 Rab22a过表达

3.2.2 干扰Rab22a

3.2.3 间接免疫荧光测定CSFV滴度

3.2.4 BCA试剂盒测定蛋白浓度

3.2.5 Western blot 检测Rab22a蛋白表达情况

3.2.6 突变体Rab22a Q64L和Rab22a S19N对CSFV增殖的影响

3.2.7 数据分析

3.3 结果

3.3.1 Rab22a过表达对CSFV复制的影响

3.3.2 干扰Rab22a对CSFV复制的影响

3.3.3 突变体Rab22a S19N和Rab22a Q64L对CSFV复制的影响

3.3.4 Rab22a蛋白对CSFV增殖的影响

3.4 讨论

3.5 小结

结 论

本文的创新点

参考文献

附录A 缩略词中英文对照表（Abbreviation Index）

致 谢

个人简历