新狼毒素A对KV1.4钾离子通道作用分子机制的研究

摘要

目的：　　瑞香狼毒（瑞香科）是一种有毒的多年生草本植物，广泛分布在蒙古，西藏和中国北方地区。新狼毒素A（NCA）为瑞香狼毒的主要活性成分，具有广泛的药理学活性。然而其作用于离子通道的机制尚不清楚。KV1.4钾离子通道属于电压门控钾通道家族，主要分布在脑、心肌、人类和哺乳动物的骨骼肌中，具有重要的生理功能。　　方法：　　本研究运用全细胞膜片钳技术研究NCA对KV1.4钾离子通的作用，并结合丙氨酸扫描法研究其结合位点。　　结果：　　1.NCA对KV1.4钾离子通道电流抑制作用的IC50为7.55μM。　　2.成孔区的V560A和V549A两位点能够显著性地改变NCA的阻断作用，推测这两个位点为NCA作用的靶点。　　3.然而，数据显示该阻断作用无use-dependence现象，且NCA对通道稳态激活，失活和失活的恢复无作用。　　4.一些研究表明K531为一些药物的结合位点，我们同时对该位点进行研究。研究表明，对于该阻断，K531A无显著性作用。　　结论：　　NCA对KV1.4钾离子通道电流抑制作用的IC50为7.55μM，KV1.4钾离子通道上的V560和V549两位点为NCA的作用位点。