系统性红斑狼疮患者激素耐药机制及中药干预逆转的研究

摘要

目的：　　探讨系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血淋巴细胞激素耐药以及中药有效成分葛根素、三七皂苷逆转耐药作用的机制；研究能抑制SLE患者外周血淋巴细胞P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）高表达的中药，为临床提供逆转激素耐药、提高治疗敏感性的新思路和新方法。　　方法：　　利用密度梯度离心法分离单个核细胞，用贴壁培养去除单核细胞以纯化淋巴细胞，并悬浮培养；以四唑盐比色法（MTT）筛选葛根素、三七皂苷(PNS)、异搏定(VER)对淋巴细胞的最高非细胞毒浓度（细胞存活率﹥90％）作为干预浓度，并用此法测定甲基强的松龙（MP）诱导淋巴细胞凋亡的最佳浓度；以葛根素、三七皂苷作为逆转激素耐药的中药制剂，异搏定作为对照组，流式细胞术检测分离培养的淋巴细胞 P-gp及Annexin V表达以及健康志愿者和SLE患者外周全血淋巴细胞P-gp表达；用SLEDAI标准评分SLE患者疾病活动性，分析P-gp表达与SLEDAI积分相关性。　　结果：　　1.SLE患者外周血淋巴细胞 P-gp表达显著高于健康志愿者，并且与疾病活动性显著相关；　　2.葛根素（80ug/ml）、三七皂苷（200ug/ml）可显著下调SLE患者外周血淋巴细胞 P-gp的高表达，作用强于异搏定；　　3.葛根素、三七皂苷能进一步增强甲强龙诱导的SLE患者外周血淋巴细胞的凋亡；　　4.在葛根素、三七皂苷干预前后，激素诱导的SLE患者外周血淋巴细胞P-gp表达与Annexin V呈显著负相关，异搏定干预前后两者两者之间未显示出显著的相关意义。　　结论：　　1.P-gp介导的多药耐药是SLE患者激素耐药的重要机制之一；　　2.葛根素、三七皂苷可显著下调SLE外周血淋巴细胞P-gp高表达；　　3.葛根素、三七皂苷可协同激素增强诱导淋巴细胞凋亡的作用，对SLE患者外周血淋巴细胞激素耐药有显著逆转作用；　　4.葛根素、三七皂苷与竞争性钙通道阻滞剂（异搏定）逆转耐药机制不同，有待进一步研究。

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中文摘要

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前言

一、材 料 和 方 法

（一）实验材料

（二）实验方法

(三)数据统计

二、结果

（一）SLE患者外周血淋巴细胞P-gp表达及与病情活动相关性

（二）葛根素、三七皂苷、异搏定对淋巴细胞的最高非细胞毒浓度以及甲基强的松龙对淋巴细胞的最佳凋亡浓度

（三）葛根素、三七皂苷对SLE患者外周血淋巴细胞P-gp表达的干预作用

（四）葛根素、三七皂苷协同激素诱导SLE患者外周血淋巴细胞凋亡

（五）P-gp表达与甲强龙诱导SLE患者外周血淋巴细胞凋亡的相关性

三、分析与讨论

（一）SLE患者P-gp表达与激素耐药

（二）葛根素对淋巴细胞P-gp表达及其介导的激素耐药的影响

（三）三七皂苷对淋巴细胞P-gp表达及其介导的激素耐药的影响

（四）葛根素、三七皂苷逆转SLE患者外周血淋巴细胞激素耐药的机制与传统P-gp竞争性逆转剂的差异

结论

参考文献

致谢

附：文献综述:SLE患者外周血淋巴细胞P-gp表达与激素疗效关系的研究进展