末端转移酶介导的反转录PCR用于检测肝损伤标志物microRNA

目录

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第1章 绪论

1.1引言

1.2 miRNA简介

1.3 miRNA检测方法

1.3.1 界面阵列杂交

1.3.2 NGS

1.3.3 Microarrary

1.3.4 RT-qPCR

1.4末端脱氧核糖核苷酸转移酶（TdT）

1.4.1 TdT概述

1.4.2 TdT的生物学功能

1.4.3 TdT的聚合性质

1.4.4 TdT在生物化学领域中的应用

1.5本论文的研究内容与研究意义

第2章 TdT以RNA为引物的聚合性质初步探究

2.1 引言

2.2 实验部分

2.2.1 实验试剂与仪器

2.2.2 引物的合成与修饰

2.2.3 通过荧光读数仪验证RNA引发物的TdT聚合反应

2.2.4 通过琼脂糖凝胶电泳表征RNA引发的TdT聚合反应

2.2.5 通过变性PAGE表征荧光标记引发物的TdT聚合反应

2.3 结果与讨论

2.3.1 荧光读数仪表征以RNA为引物的TdT聚合反应

2.3.2 琼脂糖凝胶电泳表征TdT以RNA为引物的聚合反应

2.3.3 变性PAGE表征荧光标记引发物的TdT聚合反应

2.4 本章小结

第3章TdT介导的反转录扩增方法用于检测肝损伤标志物

3.1 引言

3.2 实验部分

3.2.1 实验试剂与仪器

3.2.2 引物的设计与合成

3.2.3 TdT介导的反转录PCR流程

3.2.4 TdT介导的反转录扩增的可行性探究

3.2.5 反应条件优化

3.2.6 检测灵敏度探究

3.2.7 特异性探究

3.2.8 通用性探索

3.2.9 对实际样品的检测

3.2.10 TdT介导的以单一dNTP为底物的反转录PCR

3.3 结果与讨论

3.3.1 TdT介导的反转录PCR的原理构建

3.3.2 TdT介导的反转录扩增可行性分析

3.3.3 反应条件优化

3.3.4 检测灵敏度分析

3.3.5 特异性分析

3.3.6 通用性研究

3.3.7实际样品检测效果

3.3.8 TdT介导的以单一dNTP为底物的反转录PCR研究

3.4 本章小结

第4章 全文结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

致谢