白细胞介素6及其启动子基因多态性与儿童1型糖尿病相关性的研究

摘要

目的: 1型糖尿病是儿童常见的内分泌疾病，它的发病是遗传，环境，免疫因素共同作用的结果。1型糖尿病是多基因疾病，白细胞介素6(IL-6)是近年研究认为可能与1型糖尿病相关的细胞因子。本研究检测1型糖尿病病例组及对照组外周血白细胞介素6的水平。探讨它在1型糖尿病患儿体内的变化，同时应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性法(PCR-RFLP)对白细胞介素6基因启动子-572位点进行研究，探讨此位点基因多态性是否与1型糖尿病相关，对于不同基因型进一步探讨其是否与外周血IL-6的水平，发病年龄及发病时空腹C肽水平相关。 方法: 1.应用放射免疫分析法检测1型糖尿病患儿组及对照组外周血IL-6水平。 2.应用盐析法提取病例组与对照组外周血的DNA，并在1％琼脂糖凝胶电泳上观察提取结果。 3.应用聚合酶链式反应对病例组及对照组包含IL-6基因启动子-572位点的特异片段进行扩增，扩增的目的片段用2.5％琼脂糖凝胶电泳检测。 4.将扩增产物用MbiI内切酶进行酶切，酶切产物在3％琼脂糖凝胶电泳上检测，并对其进行定性分析。 5.应用放射免疫分析法检测病例组外周血的空腹C肽水平。 6.根据Hardy-Weinburg遗传平衡定律检查病例组及对照组所得基因型是否具有群体代表性。 7.应用SPSS15.0统计软件对所得数据进行分析，其中病例组与对照组外周血IL-6水平的比较及病例组中首诊病人与复诊病人外周血IL-6水平的比较均采用两组独立样本的t检验。病例组与对照组的IL-6基因启动子-572位点基因型频率的比较采用Fisher精确概率法，等位基因频率的比较采用x2检验，用相对比值比及95％可信区间表示相对危险度。不同国家IL-6基因启动子-572位点基因型频率的比较采用x2检验或Fisher精确概率法。病例组不同基因型间IL-6水平，发病年龄及发病时空腹C肽水平的比较均采用两组独立样本的t检验。 结果: 1.病例组与对照组儿童性别及年龄的差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。 2.病例组与对照组儿童外周血IL-6水平的比较差异无统计学意义，病例组中首诊病人与复诊病人外周血IL-6水平的比较差异仍无统计学意义。(P>0.05)。 3.IL-6基因启动子-572位点经PCR扩增后产物片段为163bp，酶切后分为3种基因型，CC型为1条带(163bp)，GC型为3条带(163bp，101bp，62bp)，GG型为2条带(101bp，62bp)。 4.病例组与对照组基因型频率符合Hardy-Weinburg遗传平衡定律，具有群体代表性。 5.对照组IL-6基因启动子-572位点基因型及等位基因频率的分布与中国其他研究结果比较差异无统计学意义(P>0.05)，与日本比较差异无统计学意义(P>0.05)，与法国、美国比较差异有统计学意义(P<0.05)。 6.病例组与对照组IL-6基因启动子-572位点基因型频率及等位基因频率分布的差异均有统计学意义(P<0.05)，等位基因频率的相对风险分析示G等位基因的携带者患1型糖尿病的风险是C等位基因携带者的1.939倍(OR=1.939，95％CI=1.023～3.678)。 7.病例组IL-6基因启动子-572位点不同基因型间IL-6水平的差异无统计学意义。(P>0.05)。7.病例组IL-6基因启动子-572位点不同基因型间发病年龄的差异有统计学意义(P<0.05)，其中携带G等位基因的患儿发病年龄早于CC基因型的患儿。 8.病例组IL-6基因启动子-572位点不同基因型间空腹C肽水平的差异无统计学意义。(P>0.05) 结论:1.1型糖尿病患儿体内IL-6水平无变化，IL-6基因启动子-572位点不同基因型患儿体内的IL-6水平亦无变化。 2.不同种族IL-6基因启动子-572位点基因多态性存在差异，亚洲人群可能具有相似的基因型及等位基因分布，欧美国家可能具有相似的基因型及等位基因分布。 3.IL=6基因启动子-572位点基因多态性可能与1型糖尿病的发病存在相关性，其中G等位基因可能是1型糖尿病的易感基因。 4.IL-6基因启动子-572位点不同的基因型可能与患儿患病年龄存在相关性，其中GG+GC基因型的患儿的患病年龄早于CC基因型。 5.IL-6基因启动子-572位点不同的基因型患儿患病时空腹C肽水平无差别。

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综述 白细胞介素6与1型糖尿病

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