利用SmDXSⅡ和SmGGPPS共转化策略提高丹参中丹参酮含量的研究

目录

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第一章 文献综述

1.2.2植物中其他次级代谢产物

1. 3 丹参酮的代谢途径

1. 3. 1MVA途径

1. 3. 3 丹参酮代谢途径中的重要酶基因的研究进展

1. 5 丹参酮药源问题

1. 6 本研究的选题目的和意义

第二章 材料与方法

2. 1. 4 药品及试剂

2. 1. 5 实验所用的溶液

2. 2 实验方法

2. 2. 2亚细胞定位植物表达载体的构建

2. 2. 3制备表达载体

2. 2. 4亚细胞定位

2. 2. 6基因水平检测

2. 2. 7 提取丹参的总RNA与QRT-PCR

2. 2. 8 次生代谢产物的含量检测

2. 2. 9丹参中其他有效成分的GC-MS分析

2. 2. 11毛状根提取物抗肿瘤活性的分析

2. 2. 14 诱导后基因表达谱分析

第三章 结果分析与讨论

3. 2植物表达载体的构建

3. 2. 2 亚细胞定位表达载体pEGAD+SmGGPPS 的构建

3. 3 亚细胞定位

3. 4农杆菌C58C1介导的丹参遗传转化和毛状根的获得

3. 6 丹参毛状根的基因整合鉴定

3. 6. 3 毛状根基因整合鉴定

3. 6. 4拟南芥基因整合鉴定

3. 7 转基因丹参毛状根的转录水平分析

3. 8 次生代谢产物含量的测定与分析

3. 8. 1 转基因丹参毛状根中丹参酮含量测定与分析

3. 8. 2转基因丹参毛状根中丹酚酸含量测定与分析

3. 9 GC-MS分析

3. 10转基因拟南芥中次级代谢产物含量的测定与分析

3. 10. 1叶绿素及类胡萝卜素含量的测定与分析

3. 10. 2 激素含量的测定与分析

3. 11 转基因毛状根提取物的抗氧化活性分析

3.12转基因毛状根提取物抗肿瘤活性的分析

3. 13高产丹参酮的转基因丹参毛状根经过诱导处理后丹参酮含量的测定与分析

3. 14丹参毛状根经过诱导后基因表达谱的分析

第四章 总结与展望

4. 2 研究展望

致谢

参考文献

硕士期间发表的论文及成果

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