抗菌肽LL-37对中波紫外线辐射人角质形成细胞核因子-κB的影响

摘要

背景:紫外线(ultraviolet , UV)是影响人皮肤的重要外界环境因素之一,特别是中波紫外线(ultraviolet B, UVB)。UVB辐射能使皮肤发生一系列的分子事件,包括人体唯一的cathelicidin家族抗菌肽LL-37的产生和重要的细胞转录因子核因子-κB (nuclear factor-κB, NF-κB)的激活。Mookherjee等的研究表明LL-37能显著抑制脂多糖(lipo poly saccharides, LPS)诱导人单核细胞(human monocytic cells, THP-1)的NF-κB活化。LL-37是否影响UVB辐射诱导的人角质形成细胞(keratinocyte, KC)NF-κB的活化,目前国内外尚没有关于这方面的研究。
　　目的:探讨抗菌肽LL-37对UVB辐射KCNF-κB的蛋白表达及转录活性的影响,为UVB辐射对人皮肤免疫系统的影响提供一些启示及皮肤科临床医生运用UVB治疗皮肤病及诊治日光性皮肤病提供参考。
　　方法:120mJ/cm2 剂量 UVB 辐射培养的人永生化角质形成细胞株(immortalized human keratinocyte cell line, HaCaT)和原代人角质形成细胞(normal human keratinocyte, NHK),加入不同浓度的LL-37(终浓度为0, 0.5, 2, 5, 10, 20 ug/mL)共同培养4 h, 应用免疫印迹(western blotting)和电泳迁移率实验(electrophoretic motility shift assay, EMSA)方法,检测HaCaT和NHK 细胞各实验组NF-κB的蛋白表达和转录活性。
　　结果:(1)HaCaT和NHK细胞UVB辐射组NF-κBp65总蛋白表达较未作UVB辐射的空白对照组有大幅增高,具有统计学意义(P<0.001)。HaCaT和NHK细胞UVB辐射+不同浓度LL-37处理组NF-κBp65总蛋白表达均明显低于相应的UVB辐射组,具有统计学意义,且具有剂量依赖性,其中HaCaT细胞UVB辐射+0.5μg/mLLL-37处理组P<0.05,其他实验组P<0.001。(2)HaCaT和NHK细胞UVB辐射组NF-κB的转录活性较未作UVB辐射的空白对照组有大幅增高,具有统计学意义(HaCaT细胞UVB辐射组P<0.05,NHK细胞UVB辐射组P<0.001)。HaCaT和NHK细胞UVB辐射+不同浓度LL-37处理组NF-κB的转录活性均低于相应的UVB辐射组,具有剂量依赖性,其中HaCaT细胞UVB辐射+2,5,10μg/mLLL-37处理组P<0.05,UVB辐射+20μg/mLLL-37处理组P<0.001,UVB辐射+0.5μg/mLLL-37处理组不具有统计学意义,NHK细胞UVB辐射+10μg/mLLL-37处理组P<0.05,UVB辐射+20μg/mLLL-37处理组P<0.001,其他实验组不具有统计学意义。
　　结论:LL-37可抑制UVB辐射诱导的HaCaT和NHK细胞NF-κB的蛋白表达和转录活性的增加,且这种抑制具有剂量依赖性。

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中英文缩略词表

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英文摘要

1、前言：

2、材料与方法

2.1 实验材料

2.2 实验内容与方法

3、实验结果

3.1 LL-37对UVB辐射HaCaT和NHK 细胞NF-κB蛋白表达的影响

3.2 LL-37对UVB辐射对HaCaT和NHK细胞的NF-κB转录活性的影响

4、讨论

5、结论

参考文献

附录一

附录二

附录三（课题综述）