凝血酶敏感素蛋白酶4/5在骨性关节炎滑膜中的表达及意义

摘要

探讨凝血酶敏感素金属蛋白酶4/5(ADAMTS4/5)在人骨性关节炎(OA)滑膜病变中的表达情况及ADAMTS4/5的表达与人OA发生发展的关系现有的研究证实主要有两类酶参与了OA,即基质金属蛋白酶(MMP)家族和蛋白聚糖酶家族,其中以ADAMTS4/5为最新的研究热点。MMP介导的蛋自聚糖降解已得到广泛研究,本文着重研究和论述凝血酶敏感激素蛋白酶4/5是骨性关节炎早期病变(滑膜病变期),参与人滑膜炎症性病变的主要蛋白酶,其在骨性关节炎的发生发展中有着非常重要的作用。
　　目的在于研究凝血酶敏感激素蛋白酶(ADAMTS4/5)在骨性关节炎滑膜组织及滑膜细胞中的表达及意义。
　　研究对象为取6例正常人滑膜组织和6例骨性关节炎患者滑膜组织,Westernblot测定标本中ADAMTS4/5的表达,离体培养正常人滑膜细胞,IL-1β诱导正常滑膜细胞,测定滑膜细胞中ADAMTS4/5的表达;采用IL-1RA阻断IL-1β后,测定滑膜细胞中ADAMTS4/5的表达。
　　研究结果：1:滑膜组织中ADAMTS4/5的表达情况Westernblot结果显示OA组滑膜组织中ADAMTS4/5的表达明显高于正常组;2:滑膜细胞蛋白表达水平不同剂量IL-1β刺激人滑膜细胞后,发现随着剂量的增加,ADAMTS4的表达量增加,ADAMTS5的表达量未见明显增加;3:正常滑膜细胞和诱导后滑膜细胞的增殖倒置显微镜下观察,正常传代人滑膜细胞核周围边界清楚,呈卵圆形,位于细胞中间,核仁明显可见。IL-1β刺激后发现,滑膜细胞增殖明显,但形态未发生明显变化,加入IL-1RA后,滑膜细胞增殖不明显,形态也未发生明显变化;4IL-1RA降低IL-1β诱导水平IL-1β刺激人滑膜细胞后,ADAMTS4/5的表达均高于正常组,加入IL-1RA后,ADAMTS4/5的表达量降低明显。
　　结论：IL-1β可以按照剂量依赖方式正向调节ADAMTS4/5的表达;ADAMTS4/5和IL-1β在骨性关节炎滑膜炎症性病变机制中发挥重要的作用。在测定滑膜细胞蛋白表达的研究过程中。发现ADAMTS4/5的表达量随着IL-1β浓度刺激的增加而增加。

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中文摘要

英文摘要

1，引言

2，材料与方法

2.1，试验取材

2.2，试验仪器

2.3，药物与试剂

2.4，滑膜细胞的分离、培养以及传代

2.5，组织的取材

2.6，滑膜组织蛋白提取

2.7，滑膜细胞蛋白提取

2.8，Western blot测定滑膜组织蛋白表达水平

2.9，Western blot测定滑膜细胞蛋白表达水平

2.10，IL-1β诱导正常组滑膜细胞

2.11，IL-1RA降低IL-1β诱导水平

2.12，统计学处理

3，结果

3.1，滑膜组织中ADAMTS4/5的表达情况

3.2，滑膜细胞蛋白表达水平

3.3，正常滑膜细胞和诱导后滑膜细胞的增殖

3.4，IL-1RA降低IL-1β诱导水平

4，讨论

6，结论

参考文献

附录（个人简历)

致谢

金属蛋白激酶在骨性关节炎发病机制中的研究