自体-异体混编肌腱重建前交叉韧带移植物腱骨愈合的实验研究

摘要

目的：前交叉韧带是膝关节的重要组成部分，随着运动事业和交通工业的发展，前交叉韧带损伤越来越多见，关节镜下韧带重建是目前治疗其损伤的金标准。重建材料的选择一直是影响手术预后的重要因素，在传统的自体、异体肌腱的选择基础上，近年来出现了以自体-异体混编肌腱作为移植材料的术式。本研究通过比较应用自体、异体及自体-异体混编肌腱重建前交叉韧带移植物腱骨愈合的组织学变化过程，为临床上混编肌腱的应用提供理论依据。
　　方法：选取45只健康成年新西兰兔，将其随机平均分为混编组、自体组及异体组。肌腱的制备：切取混编组兔左侧、异体组兔双侧趾长伸肌腱，生理盐水漂洗干净后放入15％二甲基亚砜溶液的冻存管中，先将冻存管放置于普通冰箱中（4℃）30min后置入深低温冰箱（-20℃）30min，最后放入-80℃深低温冰箱中冰冻2周备用。2周后取出冻存管，放入37℃水浴箱中快速解冻，解冻后从管中取出肌腱将其浸泡于含庆大霉素的生理盐水中。切除异体组、混编组兔右膝前交叉韧带，将预备好的趾长伸肌腱，两两合成双股异体及混编待移植物后重建兔右膝前交叉韧带。自体组兔取各自双侧趾长伸肌腱，双股编织后重建右膝前交叉韧带。术后于第3，8及12周时，分别随机处死各实验组兔5只，取其膝关节，置于10%福尔马林溶液中固定48小时后，骨科电锯将移植物股骨、胫骨隧道部分别制成薄骨块，放入10%硝酸溶液中脱钙3天，再将其做成石蜡切片。采用HE染色、甲苯胺蓝染色，观察重建术后各个时间点移植物腱骨愈合的变化情况，并通过IPP软件计数新生的软骨细胞。
　　结果：重建术后3周时，各组移植物腱骨界面均表现为明显的组织坏死及少量的炎性细胞浸润，胶原纤维排列紊乱。8周时，3组腱骨界面均可见大量新生组织细胞，胶原纤维纵向排列趋于有序，甲苯胺蓝染色出现异染物质。12周时，各组胶原纤维大量增生，腱骨界面出现韧带止点典型的4层结构，其中自体组胶原纤维排列更有序，止点4层结构也更清晰，可见纤维软骨和钙化的纤维软骨之间的“潮线”样分界线，而混编组、异体组未见明显的“潮线”生成。甲苯胺蓝染色显微镜下软骨细胞计数显示，术后各期腱骨界面软骨细胞含量表现为：自体组>混编组>异体组。
　　结论：前交叉韧带重建术后在相同的时间点，自体移植物腱骨愈合最优，而混编后的移植物介于自体和异体之间，其组织学愈合重塑良好，为临床上应用自体-异体混编肌腱重建损伤的前交叉韧带提供了组织学依据。

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英文缩略词表

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1 前言

2 材料与方法

2.1主要器械与试剂

2.2 实验动物及分组

2.3 实验方法

2.3.1同种异体移植物的制备

2.3.2 ACL重建术

2.3.3 标本取材

2.3.4 石蜡切片的制作

2.3.4 组织学染色

2.3.5 组织学观察及软骨细胞定量计数

2.3.6 统计学处理

3 结果

3.1 术后一般情况

3.2 实验动物肉眼形态观察

3.3 移植物腱骨愈合情况

3.4 软骨细胞计数情况

4 讨论

5 结论

参考文献

综述:肌腱重建前交叉韧带后移植物组织学转归的相关研究现状

附录

致谢

附图