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【6h】

组蛋白去乙酰化酶1对胃癌干细胞增殖分化的影响及机制

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英文缩略词表

1 前言

2 材料与方法

2.1细胞系来源:

2.2 主要仪器

2.3 主要药品和试剂

2.4 主要试剂和溶液配置如下:

2.5 实验方法

2.6 增殖实验

2.7 划痕实验

2.8 Transwell实验

2.9 实时定量PCR 检测两组细胞干性相关基因表达差异

3 结果

3.1 腺病毒转染效率。

3.2 HDAC1在转染组胃癌干细胞中表达显著低于其在非转染组的表达。

3.3 HDAC1低表达实验组胃癌干细胞增殖能力显著低于对照组胃癌干细胞。

3.4 HDAC1的低表达降低了胃癌干细胞的迁移能力。

3.5 HDAC1的低表达降低了胃癌干细胞的迁移能力。

4 讨论

5 结论

参考文献

附录个人简历

致谢

综述:胃癌干细胞研究进展

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摘要

背景与目的:胃癌干细胞是近年来的研究热点,胃癌干细胞的增殖分化与胃癌的转移及预后有密切关联。组蛋白的乙酰化修饰在胚胎干细胞增殖分化过程中起着非常重要的作用,组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)对胃癌干细胞增值分化的影响及机制未见报导,本研究拟通过慢病毒转染敲低胃癌干细胞观察 HDAC1表达对人类胃癌干细胞干性增殖、迁移及侵袭的影响以及对胃癌干细胞干性相关基因表达的影响,进一步探讨HDAC1低表达对人类胃癌干细胞增殖分化的影响及机制。
  方法:以 Nanog为胃癌细胞干性标志物,流式细胞术筛选出胃癌干细胞。通过慢病毒转染技术干扰胃癌干细胞中 HDAC1表达,实时定量 PCR(qRT-PCR)和Western Blot方法检测干扰效率。采用MTT比色法和划痕试验分别观察两组细胞增殖和迁移能力的差异;通过 transwell实验观察两组细胞侵袭能力的差异;采用RT-qPCR和Western Blot方法检测两组细胞干性相关基因表达。
  结果:HDAC1在实验组胃癌干细胞中的表达显著低于对照组(p<0.05);实验组细胞的增殖、迁移和侵袭能力显著低于对照组(p<0.05);实验组细胞干性相关基因表达显著低于对照组(p<0.05)。
  结论:HDAC1低表达降低了胃癌干细胞的增殖、迁移及侵袭能力;HDAC1低表达下调了BMi1基因表达可能是其降低胃癌干细胞的增殖、干性及侵袭的机制之一。

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