伴侣素GroEL-GroES在细菌视紫红质折叠和插膜中的作用研究

目录

声明

第一章绪 论

1.1 选题背景与意义

1.2 分子伴侣的概念

1.3 GroEL-GroES 的结构特征及功能

1.3.1 GroEL-GroES 的结构特征

1.3.2 GroEL-GroES 的功能

1.4 GroEL-GroES 辅助蛋白折叠的研究进展

1.4.1 GroEL-GroES 的作用底物

1.4.2 GroEL-GroES 相互作用模型

1.4.3 GroEL-GroES 辅助蛋白折叠机理

1.5 细菌视紫红质简介

1.5.1 细菌视紫红质定义

1.5.2 细菌视紫红质折叠研究

1.6 本文研究主要内容及结构安排

第二章 GroEL、GroES、SR1 及细菌视紫红质的制备

2.1 引言

2.2 主要实验材料及器材

2.2.1主要实验材料

2.2.2 主要实验仪器

2.2.3主要实验溶液的配置

2.3 实验内容及方法

2.3.1 GroEL、GroES、SR1 的制备

2.3.2 细菌视紫红质制备

2.4 实验结果及讨论

2.4.1 GroEL、GroES、SR1 的表达与纯化

2.4.2 Bradford 蛋白定量

2.4.3 细菌视紫红质的制备及浓度测定

2.5 本章小结

第三章 GroEL-GroES对于细菌视紫红质在 DDM中折叠的动力学研究

3.1 引言

3.2 主要实验材料及器材

3.2.1 主要实验材料

3.2.2 主要实验仪器

3.2.2 主要实验溶液的配置

3.3 实验方法

3.3.1 BR的变性及样品制备

3.3.2 GroEL与GroES、ATP 不同组合对天然态 BR的结构影响的紫外测定实验

3.3.3 变性态BR复性过程中紫外吸收测定实验

3.3.4 变性态BR复性过程中stop-flow测定实验

3.4 实验结果及讨论

3.4.1 天然态BR与GroEL结合紫外测定动力学研究

3.4.2 变性态 BR与 GroEL结合紫外测定动力学研究

3.4.3 变性态BR与GroEL结合stop-flow测定动力学研究

3.5 本章小结

第四章 GroEL介导的变性 BR插膜过程初步研究

4.1引言

4.2 主要实验材料及器材

4.2.1 主要实验材料

4.2.2 主要实验仪器

4.2.3 主要实验溶液的配置

4. 3实验内容及方法

4.3.1 大肠杆菌内膜的制备及表征

4.3.2 CroEL介导BR插膜过程的动力学测定

4.4 实验结果与讨论

4.4.1 大肠杆菌细胞内膜酶活测定

4.4.2 大肠杆菌细胞内膜反向囊泡粒径测定

4.4.3 CroEL介导BR插膜过程的动力学测定

4.5 本章小结

结论

参考文献

攻读硕士期间取得的研究成果

致谢