检测羧酸酯酶2的近红外双光子荧光探针及其在评估抗肿瘤药物中的应用

目录

声明

第1章 绪论

1.1 关于羧酸酯酶1的简介

1.2 关于羧酸酯酶2的简介

1.3 荧光成像

1.4 荧光探针设计策略与机理

1.4.1 基于福斯特共振能量转移机理

1.4.2 基于分子内电荷转移机理

1.4.3 基于激发态分子内质子转移机理

1.5 研究的目的及意义

1.6关于检测羧酸酯酶的荧光探针研究现状

第2章 近红外双光子荧光探针的设计合成及性能研究

2.1. 引言

2.2. 材料与方法

2.3 探针的设计与合成

2.3.1探针的设计

2.4. 探针DCE-CES2的合成

2.5 探针的光学性质

2.5.1 DCM-CES2对CES2的光谱性质

2.5.2 荧光强度随时间的变化测试

2.5.3 荧光强度在不同pH条件下的变化

2.5.4 双光子吸收截面的测试

2.5.5 选择性测试

2.5.6探针酶动力学测定

2.6 结果与讨论

2.6.1 化合物2-methyl-4H-chromen-4-one的表征

2.6.2 化合物2-(2-methyl-4H-chromen-4-ylidene)malononitrile的表征

2.6.3 化合物 E)-2-(2-(4-hydroxystyryl)-4H-chromen-4-ylidene)malononitrile 的表征

2.6.4 探针DCM-CES2的表征

2.6.5 荧光探针的光谱性质

2.6.6 pH对探针和反应体系的影响

2.6.7 双光吸收截面的确定

2.6.8 选择性测定

2.6.9酶动力学测定

第3章 用于特异性检测羧酸酯酶2和相关抗癌药物疗效评估的荧光探针在生物体内的应用

3.1 引言

3.2 实验部分

3.2.1 细胞毒性的测试

3.2.2 细胞培养和成像的实验

3.2.3 探针的定位实验

3.2.4 流式实验

3.2.5 流式细胞仪检测细胞凋亡和坏死

3.2.6 新鲜组织切片成像实验

3.2.7活体成像实验

3.3 结果与讨论

3.3.1 DCM-CES2的细胞毒性

3.3.2 探针与细胞最佳孵育时间的优化

3.3.3 探针的定位

3.3.4 探针对CES2的检测

3.3.5抗癌前药在细胞中激活过程中检测到CES2活性变化

3.3.6 组织和肿瘤中CES2活性的实时体内成像

3.3.7 荧光探针在小鼠中的成像

第4章 结论与展望

参考文献

在读期间发表的学术论文及研究成果

致谢