蒙药四味文冠木汤对关节炎大鼠模型关节损伤的影响及免疫调节机制

摘要

目的：通过建立类风湿性关节炎大鼠模型，分组给药治疗后，评估蒙药四味文冠木汤对大鼠产生的治疗作用。同时初步探索蒙药四味文冠木汤在治疗类风湿性关节炎中所起到的免疫调节作用，并为进一步的新药开发推广应用奠定基础。　　方法：以Wistar大鼠为研究的动物，将这些大鼠按照实验需求随机分组，分别命名为正常组、模型组、四味文冠木汤高剂量组、中剂量组、低剂量组及甲氨蝶呤组。用皮下多点注射弗氏完全佐剂的方法建立类风湿关节炎的大鼠模型。然后各组分别给药处理，正常组注射生理盐水。实验组进行2次免疫后给予药物治疗。在给予药物治疗后，选择不同时期评估模型动物的一般情况，包括致炎前、给药前、给药1周后、3周后、6周后等时期。模型动物肿胀关节的数量、足和爪肿胀的动物数量作为评价指标，公式计算大鼠足爪的肿胀程度；最后，采用ELISA试剂盒评价大鼠血清中的肿瘤坏死因子（TNF-α）、白介素（ IL-1、IL-4、IL-10）、补体（C3a、C4a、C5a）炎性因子的水平。经麻醉后处死大鼠，取滑膜组织，制备并观察HE病理切片，在光镜下观察滑膜的病理变化。电泳迁移率改变分析检测NF-кB与DNA的结合活性。RT-PCR检测TNF-α、IL-1βmRNA的表达。　　结果：在给药6周后，实验组包括蒙药四味文冠木汤中、高剂量组及甲氨蝶呤组大鼠足趾肿胀度、均与模型组大鼠比较，有显著差异（P<0.01）。蒙药四味文冠木汤低剂量组与模型组具有显著差异（P<0.05）。治疗组与正常组的大鼠足趾肿胀度相比无显著差异。在检测TNF-α、IL-1、IL-4、IL-10、C3a、C4a、C5a的水平时，模型组与正常组相比血清TNF-α、IL-1、C3a、C4a、C5a的含量明显的升高，IL-4、IL-10降低，具有显著差异(P<0.05)。蒙药四味文冠木汤中、高剂量组的炎性因子水平与模型组相比含量明显降低，IL-4、IL-10升高(P<0.05)。蒙药四味文冠木汤中、高剂量组与甲氨蝶呤组比较无显著差异，不具有统计学意义(P>0.05)。电泳迁移率改变分析检测NF-кB与DNA的结合活性显示：正常组有较弱的活性，与模型组比较，实验组NF-кB活性下降，差异极显著（P<0.01），四味文冠木汤中、高剂量组与甲氨蝶呤组和正常组的NF-кB活性比较无显著性差异。RT-PCR实验结果表明：实验组TNF-αmRNA、IL-1βmRNA含量明显低于模型组，差异显著，实验组与正常组比较无显著性差异（p＞0.05）。　　结论：蒙药四味文冠木汤对类风湿性关节炎的炎症因子有强烈的抑制作用，通过调节关节炎大鼠血清TNF-α、IL-1、IL-4、IL-10、C3a、C4a、C5a的含量，起到免疫调节作用。光镜下观察大鼠关节滑膜病理改变，与模型组比较，蒙药四味文冠木汤各剂量组疗效与甲氨碟吟组基本持平，均大鼠关节滑膜病理均有明显改善。四味文冠木汤中高剂量组和甲氨蝶呤组均可以有效抑制NF-кB的活化，使TNF-α、IL-1β表达减少。因此，蒙药四味文冠木汤中高剂量可以作为有效的治疗类风湿性关节炎药物，其效果与甲氨碟吟相类似。

目录

声明

前言

第一章 建立类风湿性关节炎大鼠模型及评价

1材料和方法

2 结果

3 小结

4 讨论

第二章 蒙药四味文冠木汤对类风湿性关节炎动物模型的免疫调节机制

1 材料和方法

2 结果

3 小结

4 讨论

结论

参考文献

文献综述:中蒙药治疗类风湿性关节炎的研究进展

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