重复使用氯胺酮对成年猫视皮层神经元凋亡和BDNF表达的影响

摘要

麻醉是实施医疗手术和损伤性动物实验的必需手段。重复使用麻醉剂可能会影响脑的结构与功能,因此,研究麻醉剂重复使用对中枢神经系统的作用机制具有重要的医学参考价值。
　　氯胺酮是临床和生理学实验中广泛使用的麻醉剂,其重复使用对神经系统活动的影响程度及可能的作用机制目前尚不清楚,本研究用盐酸氯胺酮对成年猫实施重复麻醉2个月,每3天麻醉1次。用尼氏染色显示视皮层神经元,TUNEL-原位杂交试剂盒检测凋亡细胞,免疫组织化学 ABC法标记BDNF免疫阳性神经元,以探讨重复使用氯胺酮麻醉剂对成年猫视皮层神经元存活和脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。结果发现:与正常对照组猫相比,实验组猫视皮层神经元数量没有显著差异(P>0.05),但TUNEL阳性反应的平均光密度(IOD)值显著升高(P<0.01),同时BDNF免疫阳性细胞显著增多,且BDNF免疫反应的IOD值显著增大(P<0.01)。该研究结果提示,重复使用氯胺酮麻醉会启动成年猫视皮层神经元的程序性凋亡进程,同时会增加神经营养因子的分泌,这可能对凋亡中的神经元起保护作用。

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第一章 研究背景综述-麻醉剂对神经系统的影响

1 麻醉

1.1 麻醉的分类

1.2 动物实验中常用麻醉方式、剂量和特点

1.3 麻醉方法

1.4 麻醉在动物实验中的研究现状

2 麻醉剂对脑活动的影响

2.1 麻醉与c-fos基因表达

2.2 麻醉对中枢神经系统的影响

2.3 麻醉引起细胞凋亡

3 麻醉剂对脑源性神经营养因子表达的影响

3.1 脑源性神经营养因子BDNF( brain derived neurophic factor)

3.2 麻醉与BDNF表达

4 结语

参考文献

第二章 重复使用氯胺酮对成年猫视皮层神经元凋亡和BDNF表达的影响

1 材料和方法

1.1 取材和组织准备

1.2 神经元Nissl染色

1.3 原位凋亡检测(TUNEL)法

1.4 BDNF免疫组织化学染色

1.5 数据统计与分析

2 结果

2.1 神经元密度统计与分析

2.2 凋亡细胞阳性反应强度测量与分析

2.3 BDNF免疫阳性细胞密度统计与分析

2.4 BDNF免疫反应强度测量与分析

3 讨论

参考文献

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致谢

附：本人硕士阶段的论文发表及获奖情况