论文说明
声明
摘要
符号说明
第1章前言
1．1基因编辑技术的发展
1．1．1归巢核酸内切酶介导的基因编辑
1．1．2锌指核酸酶介导的基因编辑
1．1．3类转录激活因子效应物核酸酶介导的基因编辑
1．1．4 CRISPR／Cas介导的基因编辑
1．2 CRISPR／Cas9系统的发现
1．3 CRISPR／Cas9系统的发展
1．3．1 CRISPR／SpCas9系统
1．3．2 CRISPR／Cas9n系统
1．3．3 CRISPR／dCas9系统
1．3．4其他Cas9同源蛋白系统
1．3．5单碱基编辑系统
1．3．6多基因编辑系统
1．3．7基因的表达调控
1．4 CRISPR／Cas9系统在水稻中的应用
1．4．1产量相关性状遗传改良
1．4．2水稻品质改良
1．4．3水稻抗病性改良
1．4．4杂种优势利用
1．5本研究的目的和意义
第2章材料与方法
2．2实验方法
2．2．1技术路线
2．2．2 CRISPR／Cas9载体的构建
2．2．3农杆菌介导的水稻遗传转化
2．2．4炼苗和生长
2．2．5质粒提取
2．2．6转化
2．2．7胶回收
2．2．8 CTAB法提取DNA
2．2．9 T0代植株靶位点突变分析
2．2．11水稻生理指标测定
第3章结果与分析
3．1敲除TMS5基因获得温敏不育粳稻新材料
3．1．1 tms5靶位点设计和pYLCRISPR／Cas9-tms5表达载体构建
3．1．2 T0代转基因植株突变类型分析
3．1．3 tms5突变体的变异位点分析
3．1．4 T1代植株T-DNA检测
3．1．5 tms5突变体表型观察
3．2敲除FLO2基因获得低直链淀粉水稻新材料
3．2．1水稻flo2突变体的创建和鉴定
3．2．2flo2突变体的直链淀粉含量
3．2．3flo2突变体胚乳淀粉颗粒的扫描电镜观察
3．2．4flo2突变体胚乳理化性质分析
3．3敲除PHYC基因获得早熟水稻新材料
3．3．1水稻phyC突变体的创建和鉴定
3．3．2 phyC突变体抽穗期调查
3．3．3 phyC突变体的株型性状
3．4敲除OsDof12和DTH2基因获得迟熟水稻新材料
3．4．1 dth2／osdof12双突变体的创建和突变位点分析
3．4．3 dth2／osdof12双突变体的株型性状
第4章结语
4．1编辑TMS5基因创制温敏不育粳稻新材料
4．2编辑FLO2基因创制低直链淀粉水稻新材料
4．3编辑PHYC基因创制早熟水稻新材料
4．4编辑OsDof12和DTH2基因创制迟熟水稻新材料
参考文献
附录
攻读硕士学位期间取得的研究成果
致谢
扬州大学;
