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摘要
缩略词
综述
1桃细菌性穿孔病的研究概况
1.1 Xap的发现和命名
1.2 Xap特征和引起的桃树病害症状
1.3桃细菌性穿孔病的发病规律
1.4 Xap的致病因子
1.5桃细菌性穿孔病的防治
2植物病原细菌harpin蛋白
2.1 hrp基因簇
2.2 harpin蛋白概述
2.3黄单胞菌属harpin蛋白概述
2.4 harpin蛋白的生物学作用
3本研究的目的与意义
材料与方法
1供试材料
1.1供试菌株和质粒
1.2植物材料
2主要试剂与仪器
2.1主要试剂
2.2主要仪器
2.3培养基
2.4常用溶液及缓冲液
2.5引物
3核酸操作
3.1Xap 9-4菌株DNA的提取
3.2质粒提取
3.3凝胶回收
3.4质粒的酶切与纯化
3.5连接
3.6质粒的热激转化
4亚细胞定位
4.1亚细胞定位载体的构建
4.2农杆菌的转导
4.3农杆菌侵染
5 XopA原核表达
5.1原核表达载体的构建
5.2 SDS-PAGE胶制备
5.3重组蛋白的诱导表达
5.4包涵体蛋白的变复性
5.5蛋白纯化
5.6蛋白浓缩
5.7 Western blot检测
6生物信息学分析
6.1 XopA蛋白编码基因和氨基酸序列分析
6.2 XopA蛋白的生物信息学分析
7病菌致病性和烟草上的HR测定
7.1接种菌悬液配制
8.1田间病情动态调查
8.2气象资料收集
9病害田间防治试验
9.1田间防治试验用药剂
9.2试验设计
9.3病情调查
结果与分析
1桃细菌性穿孔病发生动态和田间防治
1.1病害发生动态及天气影响
1.2桃细菌性穿孔病田间防治
2 XopA蛋白编码基因的克隆
2.1寻找xopAxa基因
2.2克隆xopAXap基因序列
3 XopAXap蛋白的生物信息学分析
3.1氨基酸组成、分子量和等电点分析
3.2疏水性、信号肽预测和跨膜区分析
3.3蛋白质二级、三级结构分析
3.4结构域、互作蛋白和结合位点预测
4大肠杆菌系统重组蛋白表达
4.1目的基因双酶切、连接及转化
4.2原核表达pCold Ⅱ∷XopAXap蛋白
4.3 XopAXap蛋白表达条件的优化
4.4 XopAXap蛋白的特性鉴定
4.5 XopAXap蛋白的亚细胞定位
讨论
1桃细菌性穿孔病的harpin蛋白
2桃细菌性穿孔病的发生规律及影响因素
3桃细菌性穿孔病的防治
参考文献
附录
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
扬州大学;