论文说明
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摘要
符号说明
第1章H1N1流感病毒和鼻腔黏膜DCs的研究进展
1.1 H1N1流感病毒
1.1.1流感病毒的结构
1.1.2流感病毒的危害
1.1.3流感黏膜疫苗
1.1.4流感疫苗目前存在的问题
1.2鼻腔黏膜DCs
1.2.1鼻腔黏膜DCs的分类
1.2.2鼻腔黏膜DCs的功能
第2章纳米材料作为黏膜免疫增强剂的研究进展
2.1两亲性聚氨基酸纳米粒子
2.2聚合物纳米颗粒
2.3金纳米颗粒
第3章CS-IONzyme对H1N1 WIV黏附鼻腔上皮细胞和树突状细胞募集的影响
3.1材料与方法
3.1.1试验材料
3.1.2试验仪器
3.1.3病毒荧光标记
3.1.4 CS-IONzyme荧光标记
3.1.6共聚焦显微镜检测H1N1 WIV黏附鼻腔黏膜上皮的情况
3.1.7共聚焦显微镜检测鼻腔黏膜下方DCs的募集和上皮CCL20的分泌情况
3.1.8流式检测鼻腔黏膜上皮细胞TLR和CCL20/5的表达情况
3.1.9流式检测颈淋巴结中摄取病毒的DCs数量
3.1.10数据分析
3.2试验结果
3.2.2 CS-IONzyme连接H1N1 MV
3.2.3 CS-IONzyme对H1N1 WIV黏附鼻腔黏膜的影响
3.2.4 CS-IONzyme对鼻腔黏膜下方DCs募集和TEDs数目的影响
3.2.5 CS-IONzyme对鼻腔黏膜上皮趋化因子分泌及摄取H1N1 WIV的DCs数量的影响
3.2.6 CS-IONzyme对颈淋巴结中摄取病毒的DCs的影响
3.2.7 CS-IONzyme对迁移至颈淋巴结中摄取病毒的DCs数量的影响
3.2.8 CS-IONzyme对鼻腔黏膜上皮TLR表达的影响
3.2.9TLR2和TLR4阻断试验
3.3讨论
参考文献
第4章CS-IONzyme对小鼠树突状细胞天然免疫应答水平的影响
4.1材料和仪器
4.1.1试验试剂
4.1.2试验仪器
4.1.3小鼠DCs的原代诱导培养
4.1.4流式检测DCs表型和活化标志
4.1.5 ELISA检测DCs分泌细胞因子
4.1.6 DCs迁移试验
4.1.7混合淋巴细胞反应
4.1.9 CS-IONzyme在DCs中的定位
4.1.10流式检测DCs中ROS
4.1.11数据分析
4.2实验结果
4.2.1 CS-IONzyme对DCs表型标志的影响
4.2.2 CS-IONzyme对DCs分泌细胞因子的影响
4.2.3 CS-IONzyme对DCs迁移能力的影响
4.2.4混合淋巴细胞反应
4.2.5 DCs吞噬FITC-Dextran的能力
4.2.6 CS-IONzyme在DCs中的定位
4.2.7 CS-IONzyme对DCs ROS水平的影响
4.2.8 ROS抑制剂对CS-IONzyme诱导DCs ROS水平的影响
4.2.9 ROS抑制剂对CS-IONzyme诱导DCs表型标志的影响
4.2.10 ROS抑制剂对CS-IONzyme诱导DCs分泌细胞因子的影响
4.3讨论
参考文献
第5章H1N1 WIV-CS-IONzyme鼻腔黏膜递送疫苗的免疫保护效力评价
5.1材料和仪器
5.1.4肺脏组织切片制备及组织病理学观察
5.1.5肺脏病毒滴度测定
5.1.6数据分析
5.2试验结果
5.2.1体重和存活率统计
5.2.2肺脏病理变化
5.2.3肺脏中病毒载量
5.3讨论
参考文献
全文总结
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
扬州大学;