基于细菌双杂交的纳米抗体筛选系统的构建及其应用

目录

声明

1 绪论

1.1 纳米抗体的发现过程

1.2 纳米抗体的结构

1.3 纳米抗体的优良特性

1.3.1 优异的理化特性

1.3.2 较低的免疫原性

1.3.3 较强的穿透性

1.3.4 高亲和力和高特异性

1.3.5 高表达性

1.3.6 易于纯化

1.3.7 易于人源化

1.3.8 易于改造与修饰

1.4 纳米抗体的类型

1.4.1 单价纳米抗体

1.4.2 多价纳米抗体和多特异性纳米抗体

1.5 纳米抗体的制备

1.5.1 纳米抗体筛选技术

1.5.2 纳米抗体文库

1.6 纳米抗体的应用

1.6.1 纳米抗体在诊断领域的应用

1.6.2 纳米抗体在医疗领域的应用

1.7 细菌双杂交系统

1.8 本课题的研究目的及意义

2 细菌双杂交系统的构建

2.1 材料与方法

2.1.1 菌株与质粒

2.1.2 引物

2.1.3 生化试剂

2.1.4 抗生素

2.1.5 仪器与设备

2.1.6 培养基

2.1.7 常用溶液配制

2.1.8 分子生物学操作

2.2 结果与讨论

2.2.1 细菌双杂交系统的构建

2.2.2 利用细菌双杂交系统筛选纳米抗体可行性验证

2.2.3 细菌双杂交纳米抗体筛选系统的优化

2.3 本章小结

3 纳米抗体合成文库的构建

3.1 材料与方法

3.1.1 菌株与质粒

3.1.2 仪器与设备

3.1.3 引物

3.1.4 抗生素

3.1.5 生化试剂

3.1.6 培养基

3.1.7 常用溶液配制

3.1.8 分子生物学操作

3.2 结果与讨论

3.2.1 纳米抗体人工合成文库的构建

3.2.2 人工合成文库的质量评估

3.3 本章小结

4 细菌双杂交纳米抗体筛选系统的应用

4.1 材料与方法

4.1.1 菌株与质粒

4.1.2 仪器与设备

4.1.3 引物

4.1.4 抗生素

4.1.5 实验试剂

4.1.6 培养基

4.1.7 常用溶液配制

4.1.8 特定抗原的细菌双杂交质粒构建

4.1.9 特定抗原的纳米抗体筛选与纯化

4.1.10 纳米抗体 ELISA 测试

4.2 结果与讨论

4.2.1 糖化血红蛋白 HbA1c的纳米抗体筛选与鉴定

4.2.2 肿瘤坏死因子 TNF-ɑ的纳米抗体筛选与鉴定

4.2.3 炭疽毒素保护性抗原 PA63的纳米抗体筛选与鉴定

4.3 本章小结

5 结论与展望

5.1 结论

5.2 展望

致谢

参考文献

附录