SSCs相关抗原在不同家畜睾丸组织中的定位

摘要

目的：为探明不同时期不同家畜睾丸组织中干细胞的表达特点，分析不同时期牛、羊和猪睾丸的组织学特征及精原干细胞(SSCs)相关抗原Oct4、Nanog、C-kit和β1-integrin在睾丸组织中的分布规律。
　　 方法：以2.5月胎龄、4月胎龄及1年、2年的黑白花奶牛；45同胎龄、75日胎龄以及4月龄的白山羊；60日胎龄和6月龄的三元杂交杜长大猪为试验材料进行组织学HE染色和免疫组化法检测。
　　 结果：组织学观察到从性分化到出生发育过程中，早期胎儿阶段的睾丸组织原始生殖细胞(PGCs)聚集程度高，呈明显的团状细胞集落，各细胞集落之间被支持细胞分隔，随着年龄增长，呈梭形的肌样细胞分布于生精小管外周，并将细胞团分隔开，形成生精小管，闭锁状态的管腔逐步增大，继而形成腔隙。随着腔隙的增大，紧贴于生精上皮基膜的部分精原细胞逐渐形成精子。
　　 免疫组化表明Oct4、Nanog、C-kit和βi-integrin在不同的睾丸组织中，SSCs在越小胎龄的家畜睾丸组织中含量越丰富，阳性细胞数量相对较多，随着胎龄增长，家畜睾丸组织中阳性细胞数量相对减少。而家畜睾丸组织中SSCs仍然存在，但含量相对减少很多。其中，(1)Oct4的表达在各家畜睾丸组织中最为广泛，Nanog与Oct4趋势相同，但数量相对减少。其中，2.5、4月胎龄牛，45日胎龄羊睾丸组织中，阳性细胞表达于生精小管细胞团和睾丸间质细胞中；75日胎龄羊和60日胎龄猪阳性表达呈环状分布于生精小管周围，睾丸间质组成细胞中相对较少；1年牛、4月龄羊阳性细胞分布于牛睾丸组织生精小管基底膜，在睾丸间质中细胞数量较少或没有；2年牛和6月龄猪仅在睾丸组织生精小管基底膜没有或者少见阳性表达；(2)C-kit和β1-integrin可见膜表达。其中，在45日胎龄羊睾丸组织中，阳性细胞岛屿状几乎布满生精小管细胞团和睾丸间质细胞的胞膜；75日胎龄羊睾丸组织阳性细胞相对减少，膜表达于曲细精管的实质部分；60日胎龄猪睾丸组织中，阳性表达于生精小管基膜处细胞，管周间质细胞未见；2.5、4月胎龄牛睾丸组织中，阳性细胞有明显的团簇状相连；4月龄羊、1年牛睾丸组织中阳性细胞相对减少，一般膜表达于曲细精管基底膜处，偶见管周间质细胞有零星阳性细胞分布。6月龄猪睾丸组织中，C-kit阳性细胞相对减少，多见于管周间质细胞胞膜，而β1-integrin则在曲细精管基膜处和管周间质细胞均有表达。2年牛睾丸组织中，阳性表达较少，曲细精管内偶见零星的胞膜表达，而在管周间质细胞却有少量膜表达。
　　 结论：家畜SSCs从性腺分化一直存在于睾丸中，雄性化后，SSCs随着个体发育，不断分裂和迁移，最后定居于曲细精管的基膜处。SSCs在胎龄越小的家畜睾丸组织中含量越丰富，更有利于SSCs的体外分离效率，随着胎龄增长，睾丸组织中阳性细胞数量相对减少，幼年及成年后家畜睾丸组织中SSCs仍然存在，但含量逐渐减少明显，SSCs的体外分离效率降低。