伊马替尼抑制Warburg效应在改善肺动脉高压大鼠肺血管重构的作用研究

摘要

背景:　　肺动脉高压（pulmonary arterial hypertension, PAH）以肺循环阻力进行性增高、肺动脉重构为特征，最终导致右心功能衰竭和死亡。目前肺动脉高压治疗药物主要通过降低肺动脉张力来改善肺循环阻力，对逆转肺动脉重构效果不明显，因此目前 PAH患者的死亡率仍居高不下。研究发现肺动脉高压发病与 Warburg效应有关，抑制Warburg效应可以改善PAH，血小板衍生生长因子受体拮抗剂伊马替尼能改善PAH、肺血管重构和右心衰竭。　　目的:　　探索伊马替尼是否通过抑制 Warburg效应改善野百合碱（MCT）PAH模型大鼠的肺血管重构。　　方法:　　60只200g-250g的SD大鼠随机分为Con组、MCT组、伊马替尼（IM）组、二氯乙酸盐（DCA）组。MCT组、IM组和DCA治疗组腹腔注射1%的野百合碱溶液，计量为60mg/kg，Con组注射等体积溶液，14天后，IM组用IM进行灌胃治疗，计量为50mg/kg；DCA组用DCA进行灌胃治疗，计量为80mg/kg，Con组和MCT组用等体积的双蒸水灌胃。MCT注射28天后，超声检测肺动脉血流动力学、右心功能相关指标，第29天，右心导管法测右心室收缩压。测压完成后，处死取组织样品，进行肺组织HE染色、肺组织免疫组化和Western blot检测相关蛋白。　　结果:　　（1）与Con组相比，MCT组的肺动脉流速、PAAT、右心室流出道流速、TAPSE降低（P<0.05）；RVID、主肺动脉与主动脉之比、RVSP、RV/(LV+S)增加（P<0.05）；HE染色显示MCT组肺组织中的血管壁明显增厚，存在血管重构的现象。（2）Western blot和免疫组化结果显示：与 Con组相比，MCT组 PDGF、PDGFR、p-PDGFR蛋白表达增加（P<0.05）。（3）Western blot和免疫组化结果显示，与Con组相比，MCT组的Glut1、Glut4，MCT4、PDK1、LDH蛋白表达升高（P<0.05）；而PDH与Con组相比表达降低（P<0.05）。（4）与MCT组相比，IM组和DCA组的肺动脉流速、PAAT、右心室流速道流速、TAPSE增高（P<0.05）；RVID、主肺动脉与主动脉之比、RVSP、RV/(LV+S)降低（P<0.05）；HE染色显示IM组和 DCA组肺组织中的血管壁明显变薄，血管重构的现象得到改善。（5）对Con组、MCT组、IM组、DCA组的肺组织进行Western blot和免疫组化实验。与MCT组相比，IM组和DCA组的Glut1、Glut4、MCT4、LDH、PDK1蛋白表达减少，PDH蛋白表达增加（P<0.05）。Glut1、Glut4、MCT4、LDH的阳性细胞率均明显减少，差异有统计学意义（P<0.05）；PDH阳性细胞率明显增加，差异有统计学意义（P<0.05）。　　结论:　　1.肺动脉高压动物模型中PDGF，PDGFR表达上调，并存在Warburg效应。　　2.伊马替尼通过抑制Warburg效应改善肺动脉高压大鼠肺血管重构。

目录

声明

专业名词缩写中英文对照表

第1章 绪论

第2章 材料

2.1 主要试剂

2.2 主要仪器

第3章 实验方法

3.1 动物实验

3.2超声检测大鼠右心功能

3.3右心导管检测大鼠肺动脉压

3.4右心室肥厚的检测

3.5 Western blot检测相关代谢蛋白

3.6 HE染色

3.7 免疫组化

3.8 统计学分析

第4章 结果

4.1 MCT诱导大鼠肺动脉高压模型建立

4.2 MCT诱导的肺动脉高压大鼠模型肺组织、肺血管PDFGF、P-PDGFR、PDGFR表达上调

4.3 MCT诱导的肺动脉高压大鼠模型肺组织、肺血管存在Warburg效应

4.4 IM可以改善肺动脉高压和肺血管重构

4.5 IM通过抑制Warburg效应改善PAH

第5章 讨论

第6章 结论

参考文献

文献综述:糖尿病发病的表观遗传学机制

科研成果

致谢