胃饥饿素通过调节EndMT改善心肌梗死后大鼠心肌纤维化

摘要

目的：近来研究表明，内皮-间质转化（ endothelial-to-mesenchymal transition，EndMT）在心血管系统的生理和病理生理过程中起着关键作用。除了参与胚胎时期心血管系统的发育，病理状态下EndMT在心脏和血管重构过程中起着重要的调节作用。心肌纤维化是在心脏损伤后心脏纤维组织增生的过程，缺血缺氧、炎症和高糖等多种刺激因素均可诱导EndMT发生，从而促进内皮细胞转化为间充质细胞。随着对抗心肌纤维化的治疗的研究的逐渐深入，EndMT在心肌纤维化的中的作用和研究越来越受到人们的关注。胃饥饿素（Ghrelin）是上个世纪90年代才被人们发现的一种内源性激素，在大鼠胃中首次被发现，起初被证明在控制食欲，维持体重，影响细胞增殖和凋亡，调节葡萄糖和脂肪代谢以及胃肠、心血管、免疫功能等方面具有重要作用。近年来，越来越多的研究发现，Ghrelin可通过抑制冠脉炎症反应，保护血管内皮功能，扩张冠状动脉，抗交感神经兴奋等方面作用改善心功能不全（heart failure，HF）患者的心功能。然而Ghrelin是否可通过调节EndMT改善心肌纤维化尚未见确切的研究报道，本实验通过冠脉结扎构建心肌梗死后心肌纤维化的大鼠模型，观察Ghrelin的治疗对大鼠心肌梗死后心肌纤维化及EndMT的影响。　　方法：本实验中将60只成年雄性SD大鼠随机分为冠脉结扎组（n=45）,假手术组（n=15）.分别进行冠脉结扎术及假手术，术后将冠脉结扎术后的大鼠随机分为对照组、Ghrelin低剂量治疗组和 Ghrelin高剂量治疗组,假手术组（Sham组）及对照组均给予生理盐水腹腔注射（0.02mg/kg?d）， Ghrelin低剂量治疗组和Ghrelin高剂量治疗组分别给予Ghrelin溶液（剂量分别为0.02mg/kg?d、0.2mg/kg?d）腹腔注射。经药物处理及普通喂食4周后，分离大鼠心脏组织，测量大鼠及其左室重量，并通过HE、Masson染色观察心肌纤维化程度，免疫荧光观察EndMT标志物α-SMA及CD-31的表达。通过 Western-Blot检测得到心肌组织中α-SMA、CD31、VE-cadherin、FSP-1蛋白表达差异。　　结果：在测量离体大鼠心脏中发现：对照组大鼠心脏重量，心脏/体重比明显大于假手术组，而Ghrelin高、低剂量组心脏重量，心脏/体重比均低于对照组。HE、masson染色中发现：对照组较假手术组心肌组织胶原纤维明显增生，Ghrelin高、低剂量组胶原纤维明显减少。免疫荧光显示MI大鼠心肌呈CD31、α-SMA染色双阳性，而Ghrelin治疗后可上调CD31表达，并下调α-SMA表达。Western-Blot检测到Ghrelin高、低处理组中α-SMA、FSP-1蛋白表达较对照组明显减少，CD31、VE-cadherin蛋白较对照组表达明显增多。　　结论：Ghrelin抑制大鼠MI后EndMT，从而改善心肌纤维化。

目录

声明

主要英文缩略语

第1章 引言

第2章 实验材料与方法

2.1实验材料

2.2实验方法

2.3 观察指标及方法

2.4 统计学分析

第3章 实验结果

3.1大鼠一般情况的观察

3.3心肌梗死后大鼠心肌组织病理形态学结果

3.4 心肌梗死后大鼠心肌组织中内皮标志蛋白及间充质细胞标志蛋白的表达

第4章讨论

第5章结论

参考文献

综述:心肌梗死后心肌纤维化的研究进展

硕士期间发表的论文

致谢