利用弱病毒载体表达Bar基因增强烟草植株对草丁膦抗性的研究

摘要

大田作物杂草防除难和除草剂引起的作物药害，已成为作物生产实际中的两大问题。转抗除草剂基因的植物能增强作物对目标除草剂抗性，可解决除草剂药害和杂草防除问题，但存在改变植物遗传性状，减少作物品种多样性等生物安全问题。利用弱病毒载体pCB-CMVF209-no2b-Bar表达抗除草剂基因增强作物对目标除草剂抗性，是一种非转基因方法。一方面它较转基因方法简易，可能是解决除草剂药害和杂草防除问题的重要途径，另一方面它不改变植物的遗传性状，且只在烟草植物中长距离移动，没有生物安全问题，因此这一方法可能具有重要的应用潜力及学术价值。　　本课题开展利用弱病毒载体表达Bar基因抗除草剂草丁膦的研究。一是构建含Bar基因的重组弱病毒载体，采用酶切连接法构建重组弱病毒载体pCB-CMVF209-no2b-Bar，经PCR鉴定、酶切鉴定和测序鉴定，表明目的载体构建成功。二是开展了接种弱病毒后的烟草植株抗除草剂草丁膦的效果检测，采用农杆菌浸润法在烟草植株上接种弱病毒载体pCB-CMVF209-no2b-Bar和pCB-CMVF109、pCB-CMVF309，接种10天后喷施40％草丁膦(100倍液和200倍液）对烟草植株抗草丁膦的效果观测表明，喷施草丁膦10天后，含Bar基因的处理的烟草植株生长正常，对照植株死亡。研究结果表明，利用弱病毒载体表达抗除草剂bar基因可增强作物对目标除草剂抗性。

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第一章 绪论

1.1 转基因抗除草剂研究现状

1.2 病毒载体的研究现状分析

1.3 本课题研究目的意义与研究内容

1.4研究内容和拟解决的关键问题

1.5 拟采取的技术路线

第二章 含Bar基因的重组病毒载体的构建

2.1 材料与方法

2.2 结果与分析

2.3 小结与讨论

第三章 重组弱病毒载体表达Bar基因增强本生烟对草丁膦的抗性

3.1 材料与方法

3.2 结果与分析

3.3 小结与讨论

第四章 总结与展望

4.1 结论

4.2展望

参考文献

附录1 重要试剂配制

附录2 缩略词

致谢

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