牡丹皮中丹皮酚提取工艺优化及药理作用的研究

摘要

牡丹皮为毛茛科植物牡丹(Paeonia suffruticosa Andr.)的干燥根皮。味苦辛，微寒。牡丹皮作为重要的传统中药材，越来越受到广泛的研究和重视，具有广泛的开发和应用价值。药理学研究结果表明，牡丹皮具有抗菌、抗病毒、降血糖、抗炎，对免疫系统、心血管系统、血液系统均有一定的影响。近年来有许多牡丹皮化学成分分析方面的研究报道。研究的化学成分主要为丹皮酚及其衍生物、芍药苷及其衍生物。
　　本文以丹皮酚的提取效率为指标，优化出水蒸气蒸馏法以及超临界 CO2萃取法提取牡丹皮中丹皮酚的最佳提取工艺条件；薄层色谱法，核磁共振法检测分析超临界CO2萃取法对牡丹皮提取物成分的影响；同时还初步研究了丹皮酚抑菌、抗炎等药理作用，主要内容如下：
　　优化水蒸气蒸馏法提取牡丹皮中丹皮酚工艺中，首先通过单因素试验初步得到最佳条件，然后再采用正交试验法系统考察浸泡温度、浸泡时间、料液比以及加盐量对丹皮酚提取率的影响，优选出丹皮酚最佳提取工艺为：浸泡温度40℃，浸泡时间3h，料液比1：6，加盐量1％。
　　优化超临界 CO2萃取法提取牡丹皮中丹皮酚工艺中，首先通过单因素试验初步得到各因素最佳条件，然后再采用正交试验法系统考察萃取温度、萃取压力、CO2流量和分离温度对丹皮酚得率的影响，优选出丹皮酚最佳提取工艺为：萃取温度50℃，萃取压力23Mpa，CO2流量16L/h，分离温度40℃。并采用响应面优化超临界CO2萃取法萃取丹皮酚条件，以丹皮酚提取率为响应值Y，萃取温度A、萃取压力B和CO2流量C为自变量，建立响应面方程为：
　　Y=1.91-0.083A+0.13B+0.100C+0.035AB+0.050AC-0.010BC-0.039A2-0.36B2-0.10C2 R2=0.9537
　　薄层色谱法比较丹皮酚标准品与提取物，结果显示：在薄层板的同一位置提取物（供试品）和丹皮酚对照品显示相同斑点。表明该提取方法能有效的将牡丹皮中丹皮酚提取出来。
　　经过纯化的丹皮酚和标准品在紫外光谱下进行扫描比较，结果显示：经纯化的牡丹皮提取物与丹皮酚标准品成分一致，且纯化率较高。
　　核磁共振氢谱显示丹皮酚结构中共有5种氢原子，与药典及文献中所报道的丹皮酚结构一致，说明CO2超临界萃取法提取牡丹皮中丹皮酚并未破坏丹皮酚结构。
　　采用琼脂平板打孔法研究了丹皮酚对常见的细菌和真菌的抑制作用。结果表明：丹皮酚对细菌和真菌均有一定的抑制作用，但是对细菌的抑制作用比对真菌强。在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中，丹皮酚对枯草芽孢杆菌的抑制作用稍强，在丹皮酚浓度为0.2%就对其有抑制作用。在黑曲霉及木霉中，对黑曲霉抑制作用最强。
　　通过研究丹皮酚对大鼠足跖因角叉菜胶所引起的肿胀的影响，研究了丹皮酚的体内抗炎作用。结果表明：丹皮酚对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀抗炎效果明显。

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1.文献综述

1.1牡丹研究概述

1.2 丹皮酚国内外研究概论

1.3 CO2超临界流体萃取法研究概述

2.引言

3.材料与方法

3.1 实验材料

3.2 实验方法

4.结果与分析

4.1检测波长的确定

4.2 标准曲线的绘制

4.3 水蒸气蒸馏法优化牡丹皮中丹皮酚提取工艺

4.4超临界CO2萃取法优化丹皮酚提取工艺

4.5水蒸气蒸馏法与超临界CO2萃取法提取丹皮酚的检测分析

4.6 丹皮酚药理作用的研究

5. 讨论

5.1水蒸气蒸馏法对牡丹皮中丹皮酚提取的影响

5.2 CO2超临界萃取法对牡丹皮中丹皮酚提取的影响

5.3 核磁共振氢谱(1HNMR) 法鉴定丹皮酚结构

5.4 丹皮酚抑菌、抗炎作用的研究

6. 结论

6.1水蒸气蒸馏法优化丹皮酚提取工艺

6.2超临界CO2萃取法优化丹皮酚提取工艺

6.3 响应面法优化超临界CO2萃取法

6.4 超临界CO2萃取法所提取丹皮酚成分的检测与分析

6.5 丹皮酚对细菌、真菌的抑制作用

6.6 丹皮酚抗炎作用研究

参考文献

致谢

作 者 简 介