转sm-Nvas基因抗稻瘟病水稻sm-YTB的研究

目录

声明

第一章文献综述

1.1水稻抗稻瘟病研究

1.1.1水稻稻瘟病及其感染过程

1.1.2水稻抗稻瘟病基因资源

1.1.3水稻抗稻瘟病基因的克隆及其应用

1.1.4 非水稻植物来源抗稻瘟病基因的克隆及应用

1.2 转基因抗稻瘟病水稻育种研究

1.2.1转基因植物育种流程及安全评价

1.2.2转基因抗稻瘟病水稻育种的研究进展

1.3 非水稻植物抗稻瘟病基因sm-Nvas及其应用

1.4 本研究的意义

第二章外源基因sm-Nvas在转基因植株后代中的遗传稳定性检测

2.1引言

2.2实验材料与试剂

2.2.1实验材料

2.2.2实验仪器

2.2.3实验试剂

2.2.4试剂配制

2.2.5引物序列

2.3实验方法

2.3.1 转sm-Nvas基因水稻种植

2.3.2 CTAB法提取转sm-Nvas基因水稻总DNA（小量）

2.3.3 转sm-Nvas基因水稻阳性鉴定

2.3.4 转sm-Nvas基因水稻中转基因标记物的分子检测

2.4结果与分析

2.4.1转sm-Nvas基因水稻阳性鉴定

2.4.2 pCAMBIAI1305.1∷sm-Nvas载体质粒检测引物

2.4.3转sm-Nvas基因水稻中转基因标记物分子检测

2.5讨论

第三章转基因水稻中sm-Nvas在YTB组整合位点分析

3.1引言

3.2实验材料与试剂

3.2.1实验材料

3.2.2实验仪器

3.2.3实验试剂

3.2.4试剂配制

3.2.5引物序列

3.3实验方法

3.3.1 CTAB 法提取转sm-Nvas基因水稻总DNA

3.3.2外源sm-Nvas基因整合位点检测

3.3.3TAIL-PCR产物纯化、克隆和测序

3.3.4 T-DNA侧翼序列的验证

3.3.5 T-DNA整个位点纯合性检测

3.4 结果与分析

3.4.1 T-DNA右边界整合位点的检测和分析

3.4.2 T-DNA左边界整合位点的检测和分析

3.4.3 T-DNA左边界侧翼序列验证

3.4.4 T-DNA右边界侧翼序列的验证

3.4.5 转sm-Nvas基因整合位点纯合性鉴定

3.5讨论

第四章转sm-Nvas基因水稻稻瘟病抗性分析

4.1 引言

4.2 实验材料与试剂

4.2.1实验材料

4.2.2实验试剂

4.2.3实验仪器

4.2.4试剂配制

4.3实验方法

4.3.1 转sm-Nvas基因植株的种植

4.3.2 转sm-Nvas基因水稻总DNA的提取

4.3.3 转sm-Nvas基因水稻阳性鉴定

4.3.4 转sm-Nvas基因植株的稻瘟病抗性鉴定

4.4结果与分析

4.4.1转sm-Nvas基因植株阳性鉴定

4.4.2转sm-Nvas基因植株抗病性鉴定

4.5讨论

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文

硕士期间参与的研究项目及学术会议