声明
1 文献综述
1.1 研究背景
1.2 氟罗沙星的概述
1.2.1 氟罗沙星的物理性质及化学结构
1.2.2 氟罗沙星的抗菌作用机制
1.2.3 氟罗沙星的危害
1.3 氟罗沙星的检测方法
1.3.1 气相色谱法
1.3.2 高效液相色谱法
1.3.3 液相色谱-串联质谱法
1.3.4 免疫学检测法
1.4 量子点的的简介
1.4.1 量子点的结构特点及优点
1.4.2 量子点标记抗体的方法
1.5 荧光免疫分析技术
1.5.1 荧光免疫分析方法的特点
1.5.2 荧光免疫分析方法的应用
1.6 研究的目的及主要内容
2 氟罗沙星完全抗原的合成与鉴定
2.1 材料
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂及材料
2.1.3 主要试剂配方
2.1.4 实验动物
2.2 实验方法
2.2.1 完全抗原的制备
2.2.2 FLE完全抗原浓度的测定
2.2.3 FLE完全抗原紫外扫描光谱鉴定
2.2.4 FLE完全抗原SDS-PAGE鉴定
2.3 免疫学鉴定
2.3.1 免疫动物
2.3.2 包被浓度的确定
2.3.3 测定抗FLE多抗血清效价
2.3.4 测定抗FLE多抗血清的敏感性
2.4 结果
2.4.1 完全抗原浓度的测定
2.4.2 完全抗原的紫外扫描光谱
2.4.3 SDS-PAGE鉴定完全抗原
2.4.4 免疫学鉴定
2.5 讨论
2.5.1 完全抗原的合成
2.6 小结
3 氟罗沙星单克隆抗体的制备与鉴定
3.1 实验材料
3.1.1 主要仪器
3.1.2 主要试剂及耗材
3.1.3 主要试剂配方
3.1.4 实验动物及细胞
3.2 实验方法
3.2.1 SP2/0骨髓瘤细胞的培养
3.2.2 融合小鼠的选择及超免
3.2.3 制备饲养细胞
3.2.4 细胞融合
3.2.5 筛选阳性杂交瘤细胞
3.2.6 阳性杂交瘤细胞亚克隆
3.2.7 阳性克隆细胞的培养和冻存
3.2.8 测定阳性杂交瘤细胞株的稳定性
3.2.9 单克隆抗体的腹水制备和纯化
3.2.10 单克隆抗体纯度与浓度的测定
3.2.11 单克隆抗体效价与抑制的测定
3.2.12 单克隆抗体亲和力的测定
3.2.13 单克隆抗体特异性的测定
3.3 实验结果
3.3.1 杂交瘤细胞株的建立
3.3.2 杂交瘤细胞株稳定性的测定结果
3.3.3 单克隆抗体浓度及纯度的测定结果
3.3.4 测定单克隆抗体效价及敏感性
3.3.5 单克隆抗体亲和力的测定结果
3.3.6 单克隆抗体特异性的测定结果
3.4 讨论
3.4.1 单克隆抗体的制备
3.4.2 单克隆抗体的纯化
3.5 小结
4 基于量子点标记单克隆抗体建立的荧光免疫分析方法
4.1 材料与方法
4.1.1 主要实验仪器
4.1.2 主要实验试剂及耗材
4.1.3 主要溶液配方
4.1.4 QDs与抗FLE单克隆抗体的偶联过程
4.1.5 QDs与抗FLE单克隆抗体偶联效果的鉴定
4.1.6 包被浓度和QDs-mAb稀释倍数的摸索
4.1.7 直接竞争FLISA方法的建立
4.1.8 间接竞争icFLISA方法的建立
4.1.9 加标回收试验
4.2 实验结果
4.2.1 mAb-QDs偶联的鉴定
4.2.2 棋盘法确定包被浓度与mAb-QDs最佳稀释比例
4.2.3 FLISA和icFLISA方法的标准曲线及灵敏度
4.2.4 加标回收
4.3 讨论
4.3.1 量子点标记抗体
4.3.2 荧光免疫分析方法
4.4 小结
5 结论
参考文献
附录 英文缩写词汇表
个人简历
致谢
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