小鼠MOE内受AC3调控的SLC家族成员及其作用

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引 言

第一章 文献综述

1.1 小鼠的主要嗅觉器官

1.2 腺苷酸环化酶3（AC3）

1.2.1 腺苷酸环化酶（AC）

1.2.2 腺苷酸环化酶3（AC3）研究进展

1.3 小鼠主要嗅觉信号通路

1.4 溶质载体转运蛋白

1.4.1 转运蛋白

1.4.2 溶质载体转运蛋白功能介绍

1.5 蛋白质相互作用研究方法

1.5.1 蛋白质组学

1.5.2 蛋白质相互作用

1.6 细胞凋亡

1.6.1 细胞凋亡简介

1.6.2 SLC8A1,HSP与凋亡

1.7 本文的研究目的及意义

第二章 AC3 缺失后部分SLC家族成员表达情况

2.1 实验材料与试剂

2.1.1 实验动物

2.1.2 主要仪器

2.1.3 主要试剂

2.1.4 主要溶液

2.2 实验方法

2.2.1 小鼠基因分型

2.2.2 小鼠MOE组织总RNA的提取

2.2.3 cDNA的合成

2.2.4 qRT-PCR实验

2.2.5 小鼠MOE组织总蛋白的提取

2.2.6 Western blot实验

2.2.7 免疫荧光实验

2.3 实验结果

2.3.1 基因分型结果

2.3.2 MOE 中部分SLC 家族成员mRNA水平表达情况

2.3.3 MOE 中SLC8A1 与SLC6A3 蛋白水平表达情况

2.3.4 MOE 中SLC8A1 与SLC6A3 组织水平定量与定位分析

2.4 小结

第三章 SLC8A1 及SLC6A3 免疫复合物的形成

3.1 实验材料与试剂

3.1.1 实验动物

3.1.2 主要仪器

3.1.3 主要试剂

3.1.4 主要溶液

3.2 实验方法

3.2.1 小鼠MOE组织总蛋白的提取

3.2.2 SLC8A1与SLC6A3 Co-IP实验

3.2.3 SLC8A1与SLC6A3 Western blot实验

3.2.4 SLC8A1与SLC6A3 质谱实验

3.3 实验结果

3.3.1 免疫共沉淀捕获SLC6A3免疫复合物

3.3.2 质谱分析鉴定SLC6A3 免疫复合物组成

3.3.3 免疫共沉淀捕获SLC8A1免疫复合物

3.3.4 质谱分析鉴定SLC8A1 免疫复合物组成

3.3.5 MOE 中SLC8A1 与HSP90AA1相互作用

3.4 小结

第四章 SLC8A1 与凋亡

4.1 实验材料与试剂

4.1.1 实验仪器

4.1.2 主要试剂

4.1.3 主要溶液

4.1.4 细胞株

4.2 实验方法

4.2.1 NIH3T3细胞中SLC8A1 与HSP90AA1 Co-IP实验

4.2.2 培养细胞

4.2.3 siRNA-SLC8A1/NC转染NIH3T3细胞

4.2.4 NIH3T3细胞总RNA的提取

4.2.5 cDNA的合成

4.2.6 qRT-PCR实验

4.2.7 NIH3T3细胞总蛋白的提取

4.2.8 Caspase3 Western blot 实验

4.3 实验结果

4.3.1 NIH3T3细胞中敲低SLC8A1 后HSP90AA1的表达情况

4.3.2 NIH3T3细胞中SLC8A1 与HSP90AA1 相互作用

4.3.3 NIH3T3细胞中SLC8A1 与凋亡

4.4 小结

第五章 讨论

结 论

参考文献

致谢