葛根芩连汤对实验性牙周炎大鼠治疗前后血清及牙周组织中IL-1β的影响

摘要

目的：本实验通过观察实验性牙周炎大鼠各临床指标、血清及牙周组织中IL-1β水平的变化，探索葛根芩连汤对实验性牙周炎大鼠的疗效，为葛根芩连汤治疗牙周炎的临床应用提供基础理论参考。　　方法：65只健康Wistar大鼠，体重（200±10）g，雌雄各半。适应性饲养一周后开始实验。将大鼠随机分为正常对照组(N组，10只)，一般食水；余留大鼠为牙周炎模型组（P组，55只），采用0.20mm正畸结扎丝结扎左上颌第二磨牙并配合高糖软食的方法建立牙周炎模型。8周末随机处死两组各5只动物，检测各临床指标及大鼠牙周组织及血清中IL-1β的表达。剩余模型组动物按随机数字表法分为牙周炎组（P1组），基础治疗组（P2组），甲硝唑治疗组（P3组），甲硝唑配合基础治疗组（P4组），葛根芩连汤治疗组（P5组），葛根芩连汤配合基础治疗组（P6组）。P2、P4、P6组拆除结扎丝。所有动物于第9周开始灌胃：P3、P4组灌胃甲硝唑水溶液；P5、P6组灌胃葛根芩连汤浓缩液。N、P1、P2组灌胃等体积生理盐水。一天1次，连续4周，实验结束。检测实验动物龈沟出血指数、牙周袋深度及附着丧失情况。取腹主动脉血，用ELISA法测定血清中IL-1β含量。取牙及牙周组织，HE染色法观察牙周组织的组织学改变，并用免疫组化法检测大鼠牙周组织中IL-1β的表达。　　结果：1、一般情况观察，正常对照组大鼠状态良好。牙周炎模型组大鼠造模后食欲不振，烦躁不安，被毛杂乱，自主活动减少，粪便干燥。各治疗组动物经不同方法治疗后，牙周情况，肉眼观察有所改善，4周后基本恢复正常，与正常对照组比较牙周情况无明显差异。2、正常对照组大鼠牙周组织组织学观察：牙周组织无明显改变；牙周炎组：大量炎细胞浸润，破骨细胞活跃，牙槽骨吸收；治疗组：炎细胞减少，血管壁和骨髓腔周围可见大量成骨细胞。在病理切片上测量牙周探诊深度及附着丧失，并将数值进行统计学分析，模型组牙周探诊深度与附着丧失水平与正常对照组比较明显增加，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗后各组大鼠牙周探诊深度与附着丧失水平均减轻，其中以葛根芩连汤配合基础治疗组减轻明显，但与甲硝唑配合基础治疗组无显著差异。3、牙周组织中IL-1β的表达：IL-lβ位于细胞的胞浆和牙周膜的基质中，其染色为棕黄色或棕色，在正常对照组中表达呈弱阳性。8周末时牙周炎模型组表达为强阳性，与正常对照组比较IL-1β表达明显增多，差异具有统计学意义（P<0.01）；治疗后各组大鼠牙周组织中IL-1β的表达均减弱，其中以葛根芩连汤配合基础治疗组牙周组织中IL-1β减弱明显，但与甲硝唑配合基础治疗组无显著差异。4、血清中IL-1β含量变化：8周末，牙周炎模型组与正常对照组比较，血清中IL-1β水平明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.01）；治疗后各组大鼠血清中IL-1β水平均减弱，其中以葛根芩连汤配合基础治疗组血清中IL-1β减弱明显，但与甲硝唑配合基础治疗组无显著差异。　　结论：1、葛根芩连汤可显著改善实验性牙周炎大鼠的病理损害程度，治疗后大鼠龈沟出血指数、牙周探诊深度及牙周附着丧失均有所改善，其疗效与阳性对照甲硝唑组无明显差异，配合基础治疗疗效更加显著。2、葛根芩连汤能降低实验性牙周炎大鼠模型外周血清及牙周组织中IL-1β水平，有效抑制牙周炎症过程中牙周局部及全身IL-1β的表达，促进牙周炎症消退及牙周组织再生。

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引言

第1章 实验研究

1.1 材料与方法

1.1.1 主要药品及试剂

1.1.2 实验仪器

1.1.3 实验动物的选择及分组

1.1.4 实验性牙周炎大鼠模型的建立

1.1.5 治疗方法

1.1.6 龈沟出血指数的测定

1.1.7 血清采集

1.1.8 牙及牙周组织采集

1.1.9 血清中IL-1β含量的测定

1.1.10 HE染色，光镜下观察实验牙及牙周组织形态学变化

1.1.11 免疫组织化学方法检测牙周组织中IL-1β的表达

1.1.12 数据处理和统计学分析

1.2 结果

1.2.1 大体观察

1.2.2 口腔内及X线检查

1.2.3 临床指标检测

1.2.4 8周时牙周组织形态学观察

1.2.5 12周时牙周组织形态学观察

1.2.6 免疫组织化学法检测大鼠牙周组织中IL-1β含量

1.2.7 血清中IL-1β的表达

1.3 讨论

1.3.1 实验性牙周炎大鼠模型建立的意义

1.3.2 实验动物模型的建立

1.3.3 葛根芩连汤的作用

1.3.4 葛根芩连汤中有效成分对牙周炎的作用

1.3.5 IL-1β在牙周组织及血液中表达的意义

1.3.7 基础治疗的影响

1.4 结论

参考文献

第2章 综 述白细胞介素-1β与牙周炎

2.1 IL-1β与牙周炎

2.1.1 IL-1β的一般生物学活性

2.1.2 IL-1β在牙周组织中的定位

2.1.3 IL-1β在牙周炎中的致病机理

2.1.4 IL-1β基因多态性与牙周炎的关系

2.1.5 IL-1β与IL-1Ra比值与牙周炎的关系

2.1.6 IL-1β与牙周临床指数及治疗疗效的关系

2.2 发展与展望

参考文献

致谢

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