通督调神固本法对VD大鼠学习记忆能力影响的研究

摘要

目的:　　本研究以四血管阻断法（4-VO法）制备的VD模型SD大鼠作为实验对象，以通督调神固本法作为干预措施，观察通督调神固本法对VD模型大鼠学习记忆能力及PI3K/Akt信号转导通路的影响，探讨通督调神固本法对VD模型大鼠学习记忆能力的影响极其作用机制，为今后的电针治疗VD的机理研究提供新的依据。　　方法:　　将36只SPF级SD大鼠分为假手术组、血管性痴呆模型组（模型组）、通督调神固本电针组（电针组）、LY294002组(LY模型组)、LY294002+电针组（LY电针组）、DMSO+电针组（DMSO电针组），每组6只。采用四血管阻断法(4-VO)制作VD模型，在VD模型制备后立即对LY模型组及LY电针组大鼠侧脑室注射PI3K/AKt信号转导通路阻断剂LY294002，对DMSO电针组大鼠侧脑室注射DMSO溶液，造模完毕饲养一周后，对电针组、LY电针组、DMSO电针组大鼠进行电针干预治疗，取穴为“百会”、“大椎”、“脾俞”、“肾俞”，每日治疗25min，模型组、LY模型组不针刺，假手术组只进行手术创伤处理。治疗两周后，进行Morris水迷宫测试，分为定位航行实验及空间探索实验，耗时一周，记录各组大鼠逃避潜伏期及穿越原平台次数，用以评价各组大鼠的学习记忆能力。水迷宫测试后立即取材，运用Western Blot法观察各组大鼠海马组织中PI3K、AKt蛋白表达情况，从而评价通督调神固本法对VD模型大鼠PI3K/Akt信号转导通路的影响，探讨通督调神固本法治疗VD的作用机制。实验数据采用spss17.0进行统计学分析　　结果:　　1、Morris水迷宫结果　　各个组别大鼠的逃避潜伏期存在差异(P＜0.01)。假手术组与其余五组比较，假手术组逃避潜伏期明显缩短(P＜0.05);电针组与模型组逃避潜伏期比较，模型组逃避潜伏期显著长于电针组(P＜0.01);LY模型组与LY电针组两组相比较，无明显差异（P＞0.05）;模型组与LY模型组、LY电针组比较，逃避潜伏期无明显差异(P＞0.05);DMSO电针组与LY电针组比较，DMSO电针组逃避潜伏期显著缩短(P＜0.01)。　　空间探索实验结果表明，假手术组大鼠穿越原平台次数最多，与模型组、LY模型组以及LY电针组相比，有显著性差异（P＜0.01);电针组与模型组、LY模型组以及LY电针组相比较，电针组大鼠在60s内穿越原平台次数明显增多（P＜0.05）;模型组与LY模型组、LY电针组比较无明显差异(P＞0.05);DMSO电针组大鼠穿越原平台次数显著多于LY电针组(P＜0.01)。　　2、Western Blot结果　　Western Blot结果表示，假手术组PI3K、AKt的蛋白含量明显高于模型组、LY电针组、LY模型组（P＜0.01，而与电针组、DMSO电针组比较，无统计学意义（P＞0.05）;电针组与模型组相比较，两种蛋白含量均存在显著性差异(P＜0.01)，电针组大鼠海马组织中PI3K及Akt蛋白含量高于模型组;LY模型组与模型组相比较，PI3K及Akt蛋白表达均少于模型组(P＜0.05)，LY模型组与LY电针组相比较，则无明显差异(P＞0.05)。　　结论:　　通督调神固本法能改善血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力，促进血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力的恢复;通督调神固本法能增加PI3K/Akt信号转导通路中PI3K、Akt蛋白表达，进而促进细胞增殖、分化、抑制此条通路相关促凋亡蛋白的表达，减轻缺血对大鼠海马组织的损伤，发挥神经细胞保护作用，这可能是通督调神固本法治疗血管性痴呆的机制之一。

目录

声明

摘要

引言

第一章 文献研究

1．1 中医学对血管性痴呆的认识与研究进展

1．1．1 中医学对血管性痴呆病名的认识

1．1．2 中医学对血管性痴呆病因病机的认识

1．1．3 血管性痴呆的辩证分型

1．1．4 中医药治疗血管性痴呆的现状

1．2 针灸治疗血管性痴呆的临床和实验研究进展

1．2．1 针灸治疗血管性痴呆的临床研究进展

1．2．2 针灸治疗血管性痴呆的实验研究进展

第二章 材料与方法

2．1 实验材料

2．2．1 实验动物分组与模型制备

2．2．2 模型制备

2．2．3 治疗方法

2．2．4 Morris水迷宫行为学检测

2．2．5 取材与组织保存

2．2．6 Western Blot检测

2．2．7 Western blot检测蛋白的表达

2．3 数据处理与统计学分析

第三章 实验结果

3．1．1 定位航行试验结果

3．2．2 空间探索试验结果

3．2．3 Western Blot法检测大鼠海马组织中AKt、PI3K的蛋白表达结果

第四章 讨论

4．1 结果分析

4．1．1 Morris水迷宫结果分析

4．2 理论探讨

4．2．1 通督调神固本法选穴依据

4．2．2 PI3K／Akt信号转导通路与VD

4．3 不足与展望

结语

参考文献

附录

在校期间发表论文

致谢