互花米草SabZIP19与SaTRA2基因在水稻耐盐中的功能分析

目录

声明

第一章 绪论

1.1 植物高盐胁迫应答机制研究现状

1.1.1 高盐胁迫对植物生长发育与代谢的影响

1.1.2 植物对盐胁迫的适应机制

1.2 盐生植物在耐盐改良中的应用

1.3 互花米草的研究现状

1.3.1 互花米草对高盐胁迫的响应机制

1.3.2 互花米草基因在耐盐改良方面的应用现状

1.4 本研究的主要内容和意义

1.4.1 本研究的主要内容

1.4.2 本研究的意义

1.4.3 技术路线图

第二章 筛选互花米草高盐耐受性关键基因

2.1 材料

2.2 实验方法

2.2.1 互花米草的种植和盐胁迫处理

2.2.2 RNA提取和cDNA合成

2.2.3 挖掘互花米草转录组数据

2.2.4 实时荧光定量PCR

2.3 结果与分析

2.3.1 筛选并获得互花米草高盐耐受性候选基因列表

2.3.2 筛选出六个互花米草高盐耐受性候选基因

2.3.3 互花米草高盐胁迫应答基因的表达验证

2.4 讨论

第三章 互花米草SabZIP19基因在拟南芥抗盐中的功能

3.1 材料

3.1.1 植物材料

3.1.2 载体与菌种的选用

3.1.3 主要试剂

3.1.4 主要仪器和设备

3.2 实验方法

3.2.1 载体线性化

3.2.2 胶回收

3.2.3 连接目的片段与载体

3.2.4 大肠杆菌转化与验证

3.2.5 质粒的提取

3.2.6 材料处理方法

3.2.7 农杆菌转化

3.2.8 T2代SabZIP19转基因拟南芥的阳性鉴定

3.2.9 Western-blot

3.2.10 烟草瞬时表达实验

3.2.11 SabZIP19转基因拟南芥早花表型验证

3.2.12 拟南芥盐胁迫处理

3.3 结果与分析

3.3.1 互花米草SabZIP19基因的分子克隆

3.3.2 SabZIP19蛋白定位于细胞核

3.3.3 SabZIP19蛋白成功在拟南芥中表达

3.3.4 SabZIP19促进拟南芥早花

3.3.5 SabZIP19增加拟南芥耐盐性

3.4 讨论

第四章 互花米草基因在水稻耐盐中的功能分析

4.1 材料

4.1.1 主要试剂与配方

4.1.2 材料和菌种

4.1.3 所用引物

4.2 实验方法

4.2.1 互花米草基因的克隆

4.2.2 农杆菌转化及菌种保存

4.2.3 建立农杆菌介导的水稻遗传转化体系

4.2.4 转基因水稻转化的分子检测验证

4.2.5 成熟水稻的培育过程

4.2.6 转基因水稻再生苗的萌发和盐处理

4.2.8 叶绿素含量测定

4.2.9 水稻叶片根长、株高和鲜重的测量

4.3 结果与分析

4.3.1 成功克隆互花米草基因

4.3.2 转基因水稻材料的获得

4.3.3 互花米草基因成功转入水稻

4.3.4 SabZIP19盐胁迫下表型分析

4.3.5 SaTRA2耐盐验证及分析

4.4 讨论

第五章 总结与展望

5.1 总结

5.2 展望

参考文献

附录 CDS序列

致谢