缩略词对照表
1 前 言
1.1 心脏纤维化
1.2.1心脏成纤维细胞（cardiac fibroblast,CFs）转分化为肌成纤维细胞（myofibroblasts, MFB）
1.2.2 炎性反应
1.2.3 氧化应激
1.3 AngⅡ诱导心脏纤维化模型
1.3.1 AngⅡ诱导心脏纤维化
1.3.2AngⅡ诱导心脏纤维化的病理机制
1.4.1 SERCA亚型
1.4.2 SERCA的生理功能
1.4.3 SERCA2及其C674位点在心脏中的作用
1.4.4 胞浆钙介导的钙调神经磷酸酶（calcineurin，CaN）-活化T细胞核因子（nuclear factor of activated T cells, NFAT）信号通路
2 课题研究目的、内容、技术路线
2.1 研究目的
2.2.1 动物实验
2.2.2 细胞实验
2.3.1 动物实验
2.3.2 细胞实验
2.4.1 实验创新点
2.4.2 拟解决的关键问题
3 实验方法
3.1.1 实验试剂
3.1.2 实验仪器
3.1.3 实验动物
3.2.1 基因鉴定
3.2.2 AngⅡ诱导心脏纤维化模型
3.2.3心脏组织取材
3.2.4心脏组织冰冻切片
3.2.5心脏组织切片马松染色
3.2.6心脏组织切片免疫组化染色
3.2.7心脏左心室RNA提取
3.2.8荧光定量PCR
3.2.9 乳鼠心脏成纤维细胞的分离培养及传代
3.2.10 细胞免疫荧光染色
3.2.11 CFs的鉴定
3.2.12 AngⅡ处理细胞及环孢菌素A（ciclosporin A, CsA）、CDN1163干预处理
3.2.13细胞荧光染料Fluo4染色
3.2.14CFs的二氢乙啶（dihydroethidium, DHE）染色
3.2.15细胞和组织总蛋白的提取
3.2.16蛋白质印迹法
4 实验结果及讨论
4.1 AngⅡ增加ROS的生成和心脏SERCA2中C674的不可逆性氧化
4.1.1 AngⅡ增加心脏中ROS的含量
4.1.2 CFs的鉴定
4.1.3 AngⅡ增加CFs中ROS的含量
4.1.4 AngⅡ增加心脏组织中SERCA2中C674的不可逆氧化
4.2 SERCA2中C674的失活加剧AngⅡ诱导的心脏纤维化
4.2.1 小鼠基因鉴定结果
4.2.2 SERCA2中C674的失活加重AngⅡ诱导的心脏纤维化
4.2.3 心脏SERCA2中C674的失活不影响SERCA2的表达
4.2.4 心脏SERCA2中C674的失活上调纤维化相关因子的表达
4.2.5 心脏SERCA2中C674的失活上调炎性因子的表达
4.3 SERCA2中C674的失活促进CFs向MFB转化及CFs中的炎性反应
4.3.1 C674的失活不影响CFs中SERCA2的表达量
4.3.2 SERCA2中C674的失活促进CFs向MFB转化
4.3.3 SERCA2中C674的失活促进CFs中炎性因子的表达
4.4 C674的失活激活CFs中NFAT通路促进心脏纤维化
4.4.1 C674的失活引起CFs中胞浆Ca2+浓度升高
4.4.2 C674的失活激活CFs中NFAT信号通路
4.4.3 NFAT通路介导了C674的失活对CFs中纤维化及炎性相关蛋白的调控
4.5 C674的失活通过CX43-TGFβ1通路促进心脏纤维化
4.5.1 C674的失活上调心脏中CX43-TGFβ1通路蛋白的表达
4.5.2 C674的失活上调CFs中CX43-TGFβ1通路蛋白的表达
4.5.3 NFAT介导了CFs中C674的失活对CX43-TGFβ1通路的调控
4.6 SERCA激活剂CDN1163逆转C674失活对CFs表型转化及炎性蛋白的影响
4.6.1 CDN1163抑制CFs中C674失活导致的表型转化及炎性反应
4.6.2 CDN1163抑制CFs中C674失活上调的CX43-TGFβ1通路相关蛋白
4.7 讨论
5 主要结论与展望
5.1 主要结论
5.2 展望
参考文献
附录
A. 作者在攻读学位期间发表的文章
B. 作者在攻读学位期间参加的科研项目
C. 学位论文数据集
致谢
重庆大学;
